PCR-Diagnostik. Was ist das in der Gynäkologie, Hepatitis, Tuberkulose. Die Entzifferung Tests als Pass die Kosten für

In den meisten Fällen haben die Patienten mit einer solchen Situation fertig zu werden, wenn die Prüfung oder die Bestimmung PCR Krankheitsdiagnose erfordert. Es ist wichtig zu verstehen, was es ist und was gebraucht wird.

Polymerase-Kettenreaktion (PCR) - es ist eine Studie, die viele Krankheiten in den frühen Phasen der Entwicklung zu identifizieren hilft. Sein Wesen liegt ein DNA oder RNA, die in einem Organismus Erreger zu finden. PCR den Erreger in Fällen, in denen andere Arten von Studien sind unwirksam zu bestimmen.

Warum ist die PCR-Diagnose so beliebt?

Die Popularität dieses Verfahrens liegt in seiner Einfachheit und Einsatzbreite. Es wird von Ärzten verwendet, um verschiedene Krankheiten zu diagnostizieren. Es ermöglicht Ihnen, schnell komplexe quantitative und Genomforschung durchzuführen.

Einer der wichtigsten medizinischen Anwendungen klassischen PCR-Verfahren ist der Nachweis von Mikroorganismen, die pathologischen Zuständen führen kann.

Das Wesen der PCR-Analyse

PCR-Diagnostik (es wird erklärt, Molekularbiologie) ist eine molekulare Klonierungsverfahren verwendet für Analyse von kurzen DNA-Sequenz, die vorhanden ist, eine genetische in minimalen Mengen in Proben, die Material. Diese Methode wird häufig bezeichnet als „copier DNA.“

PCR-Diagnostik in vitro (außerhalb des Körpers) im Labor, und basierend auf dem natürlichen Prozess DNA vor ihrer Teilung verdoppeln. Neben der Möglichkeit, die Viren, Bakterien oder andere Mikroorganismen in der Probe zu detektieren, ermöglicht die Identifizierung von PCR ihrer Menge.

Bei Erkrankungen wie Infektionen mit dem Hepatitis-C-Virus oder humanen Immundefizienz-Virus (HIV), der Virus Last ist ein guter Hinweis auf welchem ​​Stadium die Krankheit ist und wie effektiv ist Therapie.

Mit diesen Informationen kann der Arzt bestimmen, wann die Behandlung zu beginnen und den Prozess zu überwachen. Auf diese Weise können Sie ein individuelles Konzept für jeden Patienten machen.

PCR-Diagnose umfasst drei Stufen, in denen jeweils die Anzahl der Ziel-DNA signifikant ansteigt. Als Ergebnis einer solchen Reaktion wird über eine Milliarde Kopien des Originals, oder „Ziel“ DNA erhalten, die das Vorhandensein des Virus im Körper zu bewerten gestattet. Dies ist die grundlegende Funktion des PCR-Verfahrens.

Vor- und Nachteile des Verfahrens

PCR-Diagnostik (was es oben beschrieben) wurde im Detail Kerry Mullis 1983 beschrieben. Da das Verfahren ist im Labor sehr beliebt.

Die wichtigsten Vorteile dieser Art von Forschung ist:

• Vielseitigkeit;
• die Geschwindigkeit der Ergebnisse;
• eine hohe Wahrscheinlichkeit, zuverlässige Ergebnisse zu erhalten;
• Spezifität;
• Vielzahl von Krankheiten, die bestimmt werden können.

Die Vielseitigkeit des PCR-Verfahrens ist die Fähigkeit, jedes menschliches physiologisches Material zu verwenden. Sogar ein Haar genug für die Analyse.

Der Prozess der Datenverarbeitung, durch Automatisierung kann es mehrere Stunden dauern. Spezifität ist ein spezifisches DNA-Fragment zu verteilen, die für ein bestimmtes Pathogen charakteristisch ist. Unter Verwendung von PCR-Analyse von vielen Krankheiten kann man sich als erhöht und das latente Stadium der Strömung diagnostiziert werden.

Aber trotz der großen Anzahl von Vorteilen, PCR-Diagnoseverfahren hat einige Nachteile:

• die Wahrscheinlichkeit von falsch-positiven Ergebnissen;
• eine hohe Empfindlichkeit;
• Variabilität der Mikroorganismen.

Der größte Nachteil des Verfahrens ist die Unfähigkeit, zwischen PCR lebenden Mikroorganismen von Toten zu unterscheiden. Typischerweise bedeutet dies eine Situation, wenn Sie den Erfolg der Behandlung beurteilen sollten. In diesem Fall, wenn die Krankheit behandelt wird, sind die toten Zellen noch einige Zeit in den menschlichen Körper und seine vollständige Aktualisierung erfordert eine gewisse Zeit von 4 bis 6 Wochen in Anspruch.

Hohe Empfindlichkeit ist ein Vorteil und zugleich ein Nachteil. Einige Mikroorganismen sind in geringen Mengen in den Körper. Daher wird in diesem Fall ist diese diagnostische Methode nicht informativ, und beraten andere Arten von Forschung zu verwenden.

Jegliche Mikroorganismen können mutieren. Und auch trotz der Tatsache, dass das spezifische Fragment in dem Verstärkungsprozess verwendet die Least Thema, ist es noch Mutationen erwerben können sich ändern und unsichtbar werden zu Testsysteme. Diese Situation wird durch die Tatsache erklärt, dass eine Vielzahl von Labortests des Systems unterschiedliche Ergebnisse vollständig zeigen.

In welchen Bereichen des Verfahrens

PCR-Studie kann in der klinischen Praxis zur Identifizierung verschiedener Krankheiten verwendet werden. in der Gynäkologie, Urologie, Gastroenterologie, Onkologie, etc. weit verbreitet.. Darüber hinaus ist es effektiv in der Forensik verwendet zu identifizieren und Vaterschaft herzustellen.

Diese Art der Forschung ist in der Planungsphase und während der Schwangerschaft verwendet. Die Analyse der TORCH-Infektion erfolgt das Vorliegen einer Infektion bei Frauen zu erkennen. Krankheiten, die durch eine der Infektionen können milde Form für die Frau sein, aber schwerwiegenden Geburtsfehler des Fötus zu verursachen, bis zu seinem Tod.

Auch diagnostische PCR-Methode hilft eine genetische Prädisposition für die Entwicklung bestimmte Krankheiten in der Zukunft zu identifizieren.

Das bringt Infektion Diagnose durch PCR

PCR hilft Viren, Bakterien und Pilze zu identifizieren.

Die häufigsten Krankheiten, die mit ihm diagnostiziert werden können:

• infektiöse neurologische Erkrankungen (Meningitis, Myelitis);
• Malignitäten (Leukämie, Lymphom);
• virale Krankheiten (HIV, humanes Papillomavirus, Cytomegalovirus, Enterovirus, Hepatitisvirus, Röteln, Adenoviren und al.);
• bakterielle Infektionen;
• sexuell übertragbare Infektionen (ureplazmoz, Chlamydien, Trichomonaden);
• Krankheiten, die durch Pilze (Candidiasis, Mykoplasmose);
• Herpes;
• Filatov-Krankheit;
• Tuberkulose, Lungenentzündung, Diphtherie, beide viralen und bakteriellen Ursprungs;
• Magengeschwüren, H. pylori durch andere provoziert Infektion.

Was sind die biologischen Materialien untersucht

In Anbetracht der Krankheit, Symptome und objektive Untersuchung der PCR-Diagnostik können alle flüssigen oder physiologische Natur ein Stück Stoff.

Das kann sein:

• Blut;
• Speichel;
• Phlegma;
• Urin;
• Stuhl;
• oropharyngealen Tupfer;
• Scheibe des betroffenen Gewebes;
• Synovialflüssigkeit;
• Schaben der Scheide bei Frauen oder die Harnröhre bei Männern;
• Ejakulat;
• Haare und andere.

Bei Erkrankungen des Urogenitalsystems bei Frauen oder die Harnröhre bei Männern Urin Abstrich aus der Scheide genommen. Venöses Blut gemietet für die Diagnose von Krankheiten wie HIV, Hepatitis Typ, TORCH-Infektion.

Um Onkologie auszuschließen oder zu bestätigen, während der Operation entfernt werden Stücke von Gewebe für eine Biopsie.

Wie für die Analyse vorzubereiten

Vor allem die Vorbereitungen für die Studie hängt von der Biomaterial, das aufgibt. Beachten Sie außerdem, dass Sie den Empfang von Antibiotika und anderen Medikamenten beseitigen müssen. Um die Wirksamkeit der Behandlung überwachen sollte für mindestens 4 Wochen nach der Aufnahme von Medikamenten Intervall standhalten.

Blut mietet am Morgen auf nüchternen Magen. Urin und Kot sollte in der die für diese, absolut sterilen Behälter eingebracht werden. So vor Urin zu sammeln ist notwendig, Hygiene äußeren Genitalien zu leiten.

Wenn Sie einen Abstrich mieten, müssen Sie:

• nicht für 3 Stunden urinieren;
• es ist nicht den Tag zu waschen und Duschen vor (für Frauen) empfohlen;
• pro Tag Sexualleben zu stoppen;
• Pap Frauen sollten in der Mitte des Zyklus nehmen.

PCR-Analyse Stufen

Vor Beginn der PCR muss die DNA aus der Probe isoliert werden. Isolierung von DNA ist ein mehrstufiger Prozess, der manuell oder instrumentell durchgeführt werden kann.

Nach der Probenvorbereitung beginnt Prozess PCR-Schritt:

• Trennung von Ziel-DNA (Denaturierung);
• Amplifikation (Vervielfachung) der DNA-Fragmente;
• Erkennung (Identifizierung) der DNA-Fragmente amplifiziert.

Die erste Phase der PCR wird die Denaturierung bezeichnet. Sein Wesen besteht darin, dass das Rohr mit der DNA-Probe auf eine hohe Temperatur erhitzt wird (etwa 90 Grad). Wegen der hohen Temperaturen zerstört die schwachen Bindungen zwischen den Nukleotiden Molekülen Code bilden. Das Ergebnis ist die Trennung von doppelsträngigen DNA oder RNA in zwei separate Stränge.

Für die „Reinheit“ Studie Biomaterial Forschung Sonderlösung zufließen, die die organischen Substanzen auflöst. Die Dauer dieser Phase hängt von der Art des Materials und der Erreger.

PCR-Diagnostik (was es oben beschrieben) in der zweiten Stufe führt die Vervielfachung der DNA-Fragmente auf der Basis der meist DNA-Infektion. PCR nicht die gesamte Nukleinsäure in der Probe kopieren. Es kopiert nur die spezifische Sequenz des genetischen Codes, ein kurzes Fragment (Primer).

In der zweiten Phase wird das Rohr gekühlt. Der gesamte Prozess ist automatisiert eine PCR-Maschine, ein Cycler oder Thermostat genannt und kann in wenigen Stunden abgeschlossen sein. PCR-Maschine ist so programmiert, alle paar Minuten die Temperatur des Reaktionsgemisches zu ändern. Dies geschieht, um kurze Fragmente, um mit der Einzelstrang-Vorlage in Verbindung treten konnte.

Amplifikation erfolgt in 30-40 Zyklen. Während dieser Zeit, Arzt-Assistent kopiert das DNA-Fragment und erhöht die Anzahl der Kettenreaktionsverfahren. Somit wird bei jedem Zyklus erhöht sich die Anzahl der Kopien auf mehrere Millionen oder sogar Milliarden.

In der dritten Phase der Studie ist die Identifizierung der Anwesenheit der DNA von Viren und Bakterien. Dies wird durch die Verteilung des resultierenden Gemisches durchgeführt und zur Ergänzung eine besondere Lösung. Diese Flüssigkeit ermöglicht, dass die DNA-Fragmente eine gewisse Färbung unter Einwirkung von UV-Strahlen zu erfassen. Dies ist ein Hinweis darauf, daß die krankheitserregenden Bakterien im menschlichen Körper vorhanden sind.

PCR während der Schwangerschaft

PCR-Diagnostik (was es oben beschrieben) kann zum ersten Mal während der Schwangerschaft verabreicht werden, wie obligatorisch ist. Diese Methode hilft versteckte Infektion und die Gefahr von Missbildungen beim Fötus zu identifizieren.

Für die Analyse unter Verwendung von:

• Scheidenabstrich;
• venöses Blut;
• Urin;
• Fruchtwasser und Plazentagewebe;
• spinal oder Gelenkflüssigkeit.

Es ansteckende Natur der Krankheit, die sich negativ auf die Entwicklung des Fötus beeinflussen kann, Defekte verursachen, verursachen Frühgeburten und Fehlgeburten. Sie sind besonders gefährlich im ersten Trimester und in den meisten Fällen ist eine medizinische Indikation für die Abtreibung. Diese Infektionen haben einen gemeinsamen Namen TORCH-Komplex.

PCR-Analyse hilft, das Vorhandensein oder Fehlen einer Infektion bei Schwangeren zu etablieren. Oft in der Phase der Planung der Schwangerschaft oder in den ersten drei Monaten durchgeführt. Im Fall eines positiven Ergebnisses, nimmt es die Studie wiederholt. Erst nach der Bestätigung der Ergebnisse nach der Behandlung.

PCR für die Diagnose von HIV

PCR-Verfahren zur Diagnose einer HIV-Infektion ist teuer Analyse und für spezielle Indikationen eingesetzt. Dazu gehören die Spende, sowie sie an Patienten verabreicht werden kann, die bei einem Autounfall mit Menschen, HIV-Träger erlitten haben.

PCR hilft das Vorliegen einer Infektion in den frühen Stadien zu etablieren, bevor der Körper Antikörper gegen HIV entwickelt hat. Das Ergebnis ist ein hoher Prozentsatz der Wahrscheinlichkeit Studie innerhalb 5-14 Tage nach dem Eindringen des Virus zeigen.

In anderen Fällen hilft die Anwesenheit des Virus im menschlichen Körper imunnofermentny Assay (ELISA) zu etablieren. Es definiert HIV-Antikörper im menschlichen Blut, die in 1-3 Monaten nach der Infektion zu produzieren beginnen. Die quantitative Bestimmung der Analyse von Mikroorganismen ist notwendig, die Behandlung von Patienten zu überwachen.

PCR zur Diagnose von Hepatitis

Hepatitis-C-Virus ist eine schwere Erkrankung, die zur Entwicklung von Zirrhose führen kann. Die Inkubationszeit, die bis zu 12 Monate sein kann, kann sich das Virus nicht selbst manifestiert, ist der Patient praktisch nicht ansteckend, und das Virus kann nicht durch Routine-Bluttests identifiziert werden.

Meistens, wenn vorzeitige Behandlung wird die Krankheit chronisch und von mehreren Komplikationen bedroht.

Bei Infektion mit dem Hepatitis-B ist die Inkubationszeit lang, und nicht die ersten Symptome bereits nach 4 Wochen beobachtet werden. Es war während dieser Zeit ELISA die Anwesenheit des Virus im Körper zeigen.

PCR ermöglicht Ihnen:

• Krankheit bei einer Inkubationszeit Entwicklungsstufe zu identifizieren;
• fragwürdige Analysen anderer Studien ermöglichen;
• die Wirksamkeit der antiviralen Therapie zu bewerten.

Das Fehlen von DNA-HBV nach der Behandlung durchgeführt - ein Zeichen für seine Wirksamkeit.

Test für Tuberkulose

Entwicklung provoziert Tuberkulose Tuberkelbazillus die den menschlichen Körper durch Tröpfchen in der Luft eindringen kann. Die Krankheit hat zwei Formen: offene und verdeckte. Im ersten Fall ist eine infizierte Person nicht ein Träger der Infektion und Mykobakterien in Sputum nicht erkannt, auch durch PCR werden kann. Die Gefahr dieser Form noch, wie man zu einer offenen Bühne übertragen werden.

Open (aktiv) Schritt ist eine Gefahr für andere, auch bei strikter Einhaltung der Regeln der persönlichen Hygiene. Für die Diagnose von Krankheiten mit Fluorographie und Röntgentomografie des Thorax. Auch für diesen Zweck tuberkulirovannuyu Hautprobe verwendet (Mantoux-Test). Aber die effektivste Methode der Forschung ist die PCR.

Bei der Verwendung als Testproben:

• Blut;
• Phlegma;
• Bronchien Flüssigkeit.

PCR zur Diagnose von HPV

Die Diagnose von HPV durchgeführt im Fall von Symptomen wie Papillome und Warzen im Genitalbereich. Die Studie auch in der Phase der Planung der Schwangerschaft im Fall von Unfruchtbarkeit, Fehlgeburten zugewiesen und auch in einer Situation der Infektion eines der sowie einer der Übertragungsmechanismen Partner - sexuell.

Der gefährlichste ist nicht die bloße Anwesenheit des Virus in den Körper, und seine Art. Einige seiner Typen (16 und 18) sind mit hohem Risiko und Gebärmutterhalskrebs bei Frauen verursachen können. Das PCR-Verfahren kann in Verbindung mit anderen Arten von Forschung verabreicht werden. die am häufigsten verwendeten Tupfer aus den Genitalien zu analysieren. Blut, Urin und Ausfluss als Biomaterial sehr selten verwendet.

Herpes

Dieser Test Diagnosen genitale Infektion durch Herpes-simplex-Virus Typ 1 und 2 (HSV-1 / HSV-2). Bei einem positiven Ergebnis HSV2, sollte für HIV und andere sexuell übertragbare Krankheiten getestet werden. Für die Analyse erfordert venöses Blut des Patienten. kann auch Urin, Isolation und Inhalt Ausschläge, wenn die Symptome untersucht werden.

Integrierte PCR-Screening

Im Fall des Lesens oder komplexer PCR-Assays kann, um zu verhindern, dass Krankheiten zugeordnet werden. Meistens dient der Initiator dem Patienten, gibt es Fälle, in denen eine umfassende Untersuchung zur Verhinderung des Ausbruchs von bestimmten Krankheiten in einer bestimmten Region angezeigt wird.

PCR-12 - ist eine umfassende Studie, die folgenden Infektionen umfasst:

1. Hepatitis.
2. HIV.
3. Herpes.
4. Sexuell übertragbare Krankheiten.
5. Tuberkulose.
6. Encephalitis.
7. Candidiasis.
8. Helicobacter-Infektion.
9. Cytomegalovirus.
10. Mononukleose.
11. Oncoviren.
12. Listeriose.

Transcription PCR-Analyse

Nach der Analyse des PCR-positiven oder negativen Ergebnisses kann ertönen.

Im Fall eines positiven Ergebnisses empfehlen wir Wiederinbetriebnahme Tests und quantitative PCR-Studie. Dies hilft, die Konzentration von Infektionen im Körper für die Ernennung der richtigen Behandlung zu bestimmen.

Die Genauigkeit der PCR-Diagnostik

In den meisten Fällen bietet PCR-Diagnostik hochgenaue Ergebnisse. Aber in einigen Fällen, die Richtigkeit der Diagnose weitere Untersuchungen erfordert Methoden zu bestätigen.

Aufgrund dessen, was kann ein falsches Ergebnis erhalten?

Falsch-positive Ergebnisse können als Folge der falschen Erfassung und Analyse der Forschungsverfahren erhalten werden.

Der Patient kann in dem Fall einer unzureichenden Vorbereitung auf die Lieferung von Biomaterial die Ursache von falschem Informationsgehalt sein. Ausgestattete Labore und professioneller Arzt können direkt auf die Ergebnisse der Studie beeinflussen.

Wo gehen PCR-Diagnostik

PCR-Diagnostik wird in privaten Kliniken und Laboratorien für einen Arzttermin oder auf Initiative des Patienten zum Zweck der Prävention durchgeführt. Zu bevorzugen sind Kliniken und Labors mit modernen Geräten gegeben werden, dass es nicht das erste Jahr in dem medizinischen Markt und haben sich bewährt.

PCR-Analyse: Kosten und Zeit

Diese Methode der Diagnose von hohem Wert ist anders. Der Preis reicht von 200 bis 500 Rubel für jede Spezies. Umfassender Überblick über die Anwesenheit von mehreren Infektionen erheblich Geld sparen, verglichen mit der Zahlung jeder einzelnen Studie.

Die Dauer der Untersuchung hängt von der Art der Infektion und kann überall von 1 bis 5 Tagen dauern. Außerdem hängen diese Zahlen über die Ausstattung von Labors und Ausbildung von Medizinern.

PCR-Diagnostik (dass es im Detail in diesem Artikel beschrieben wird) ist die genaue und schnelle Methode für die Studie. Es ist eine der wichtigsten Entdeckungen des zwanzigsten Jahrhunderts. auf dem Gebiet der Medizin.

Mit dieser Methode ist es möglich geworden, viele Krankheiten zu heilen. Aber vergessen Sie nicht, dass die PCR einige Nachteile hat, und ihre Wirksamkeit steigt manchmal in Verbindung mit anderen Methoden.

Registrierung des Artikels: Wladimir der Große

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