Análisis ELISA: lo que es, de decodificación de ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas de la sangre para los parásitos, la sífilis, VIH y tuberculosis. Norma en la tabla de

Gracias al desarrollo de la medicina moderna, el médico en el diagnóstico ya no necesitan depender de manifestaciones indirectas de la enfermedad o para llevar a cabo la investigación de laboratorio de varias etapas. Suficiente para mantener una prueba que confirmar o refutar la supuesta diagnóstico inicial.

Este método es un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) - Este estudio revela anticuerpos y antígenos inherentes en una variedad de patologías, lo que acelera en gran medida específicos el diagnóstico de la planta.

¿Cuál es el ELISA

análisis ELISA - se takoelaboratornoe estudio (método), que ayuda a determinar la presencia o ausencia de ciertos anticuerpos en el cuerpo para combatir el virus y su número.

La base del estudio es una reacción natural a un antígeno (un cuerpo objeto malicioso) - anticuerpo (Proteína destruye el malware) que le permite detectar la presencia de una variedad de virus, las bacterias.

ELISA es una respuesta inmune natural - la interacción del anticuerpo con el antígeno correspondiente. Así que durante IFA en el tubo con el material siendo añadido alternativamente antígenos o anticuerpos, después de lo cual es la detección de la concentración de los complejos antígeno-anticuerpo resultante.

Si se formaron partidos, entonces hay más complejos inmunes reacción enzimática se produce con una molécula unida material colorante. Es debido a un cambio de color en el curso de la indicación enzimática se produce después de la identificación de conexión definida nivel estudio de la enfermedad.

tipos de inmunoglobulinas

inmunoglobulinas humanas se diferencian en varias clases, diferentes propiedades de la estructura y las características antigénicas de cadenas pesadas (cadenas H). En todos los mamíferos, incluyendo humano, aislado cinco cadenas H, las cuales determinan las inmunoglobulinas pertenecientes a la clase respectiva: G, M, A, D, E.

Cada clase se distingue de cada otras propiedades biológicas, y capacidad de unirse a antígenos, y la fuerza de velocidad y el vínculo con la molécula.

Funciones de cada inmunoglobulina (lg) son diferentes:

Número de cuerpo	funciones	La vida media (días)	valor
G	70%	Formar una inmunidad pasiva en el recién nacido; necesaria para la respuesta inmune mejorar la fagocitosis,	21-24	proporcionar inmunidad humoral largo de las enfermedades infecciosas
M	5-10%	Tenemos que activar la fagocitosis, son capaces de unirse al antígeno 5 moléculas	5	Proporciona respuesta inmune primaria
la	10-15	Neutralizar toxinas y virus necesaria para la formación de la inmunidad temprana La formación de la inmunidad local	4-5	defensa de la mucosa
E	0,2%	causar alergias y anafilaxia activado basófilos tisulares	2	Protección contra los parásitos
D	0,2%	involucrada en el desarrollo de los linfocitos, es necesario como un receptor de membrana para el antígeno;	3	Su papel es poco estudiado

La aparición de la inmunoglobulina se produce en una especie de "cadena» - IgM IgG, de esa manera el cuerpo reacciona a la aparición del cuerpo en el antígeno. Durante laboratorio diagnóstico evalúa la concentración de los tres principales inmunoglobulina - G, M, A.

Las indicaciones para las inmunoglobulinas de ensayo entrega

El análisis ELISA se está volviendo más popular cada año.

Este tipo de investigación se acelera la declaración de diagnóstico, que es muy importante para el tratamiento de patologías tales como:

• hepatitis viral;
• la infección por VIH;
• citomegalovirus,
• El virus de Epstein-Barr,
• virus del herpes,
• sarampión
• la rubéola,
• la tuberculosis,
• salmonelosis,
• disentería,
• encefalitis transmitida por garrapatas,
• la bacteria Helicobacter,
• La enfermedad de Lyme,
• el tétanos,
• sífilis,
• la difteria,
• leptospirosis,
• clamidia,
• ureaplasmosis,
• micoplasmosis,
• tos ferina.

El mismo análisis puede identificar la infección por parásitos:

• platelmintos
• Ascaris
• amebas, gistolicheskimi
• hígado tremadami,
• Giardia,
• Toxoplasma,
• Trichinella,
• golpe de suerte,
• cestodosis.

ELISA es un marcador único para patologías autoinmunes y cánceres.

Preparación para la entrega de análisis

En preparación para el estudio deben cumplir con las siguientes reglas:

• un día antes de la toma de muestras de sangre no se puede fumar y beber alcohol,
• no participar en deportes u otras actividades físicas,
• tratar de evitar el estrés

  

• para detener el uso de drogas a más tardar 10 días antes del procedimiento.

Los mismos médicos recomiendan seguir una dieta especial - para excluir los alimentos grasos y fritos, y si investigaciones llevadas a cabo sobre la hepatitis, que no debe comer ningún verduras de color naranja, y especialmente cítricos. La donación de sangre debe ser en la mañana con el estómago vacío.

El análisis de falso positivo se debe a las recomendaciones pendientes, sobre todo alimentos grasos, Se está llevando a concentraciones excesivamente altas de triglicéridos en el plasma, debido a que la conductividad ELISA disminuye.

El procedimiento para la toma de muestras

En sangre entera, suero o plasma de sangre venosa se pueden utilizar como material de prueba. material de la cerca, por lo general llevado a cabo de la vena cubital se utiliza para este propósito aguja desechable y un tubo de vacío, 5-10 ml de sangre es necesario.

Para obtener resultados precisos, es importante para adherirse a la técnica apropiada de muestreo - una punción del vaso y el tejido circundante se debe hacer una manipulación, por lo que utiliza una aguja corta con un diámetro mayor, por lo que no daña la pared opuesta de la vena y no dañado eritrocitos.

Sólo para preservar la integridad de las células rojas de la sangre, es necesario que la sangre gotea en las paredes de los tubos.

Durante el almacenamiento, el material debe ser evitada como sea posible de ionización, además, el material no debe estar en contacto con los residuos desinfectantes, por lo que sólo se utilizan de plástico desechable vial etiquetado Nombre del paciente, fecha y hora de entrega material.

Si se desea un corto almacenamiento del material, la cámara de refrigeración se utiliza con una temperatura de 2-4 ^sobreC, si es necesario un almacenamiento más largo, el material se congela a -20 ^sobreS.

¿Cómo hacer un análisis

Después de la preparación de los materiales de asistente médico procede a las manipulaciones necesarias. Para este fin, una serie de conjuntos especiales de antígenos, a apagar la propiedad provocar respuestas del cuerpo a un estímulo es una variedad de infecciones, hormonas, alérgenos.

Esquema "antígeno-anticuerpo" se espera la respuesta es el siguiente:

• La reacción inicial - Ig definido (Ab) y el antígeno patógeno purificada (Ag).
• Para la detección de los complejos inmunes resultantes seguido nueva reacción inmunológica donde los actos específicos antígeno asociado a Ig, y el anticuerpo para que sobresalga konyugat- Ig (Ab).
• La última etapa - la reacción enzimática, junto con el conjugado de molécula de catalizador. El sustrato actúa como cromógeno (coloreadas), que durante la reacción es de color, y la intensidad del color se determina y índice cuantitativo de una inmunoglobulina en una muestra.

En la actualidad, desarrollado una amplia variedad de ELISA variantes, una clasificación clara de ellos no se encuentra. Típicamente, los métodos se consideran sobre la base de su separación en hetero- y homogéneo - todos fase de análisis que tienen lugar utilizando fase sólida o mediante el uso de única solución.

laboratorios de diagnóstico clínico modernos utilizan típicamente un (fase sólida) heterogéneo, ELISA, se quiere decir una absorción en fase sólida antígenos o anticuerpos sobre la superficie sólida de agujeros especiales ubicadas en el método de microplacas de poliestireno se divide en directa e indirecta ELISA.

En el ELISA directo, el antígeno presentado por correcciones durante el proceso de incubación en pocillos de blanco de superficie para este el material de muestra de ensayo se coloca en pocillos limpias durante 20-25 minutos, es necesario para unir a su antígeno superficie. Después de la adición del anticuerpo deseado. Además, el material permanece durante un cierto tiempo para formar enlaces.

Los anticuerpos se añaden siempre en exceso, por lo que incluso si está presente en la muestra no se asocian antígenos, y los antígenos, si no en todos, los enlaces no ser. Para eliminar el anticuerpo "extra" se lleva a cabo por decantación, dejando sólo aquellos anticuerpos que han establecido comunicación con el antígeno.

Esto es seguido por la reacción enzimática - Además de los pocillos con solución de enzima, después de lo cual el teñido se produce vínculos deriva.

En los anticuerpos método indirecto ELISA usados ​​en avance conectado al sustrato de la reacción enzimática; en este caso el acoplamiento de anticuerpos al antígeno se produce durante el proceso de incubación, que tiene lugar después de movilización de bonos en los orificios de la superficie y rellenado conjugado posterior y el sustrato de colorante reactivo cromogénico reacción.

Por lo tanto, la principal diferencia con el directa de método indirecto no es material para la superficie de unión limpiar los pozos, y la unión a antígeno inmovilizado en la placa.

Detiene la reacción mediante el uso de dispositivos especializados, cada pocillo se somete a otro proceso de fotometría, seguido de análisis comparativo del resultado obtenido con anterioridad lleva a cabo el control muestras.

Si el incremento detectado en la densidad óptica de la muestra es entonces inflado y la concentración de anticuerpos específicos en el resultado de la prueba.

Cuando el análisis está listo

El estudio no toma mucho tiempo desde la extracción de sangre para obtener el resultado va de 1 a 10 días, dependiendo de las medidas de diagnóstico.

Los resultados de la prueba y su interpretación

En el formulario, un resultado obtenido mediante el diagnóstico del paciente indica un negativo o positivo ciertas clases de inmunoglobulinas, como medida cuantitativa indicado de diversas clases anticuerpos.

Diferente interpretación de los resultados:

1. IgM (+) (IgA, IgG no se detectaron) - proceso de curación;
2. IgM (-); IgG (+), IgA (+) - patología infecciosa crónica;
3. IgM, IgG, IgA (todos los S - valor) - no hay mecanismos de defensa a la infección;
4. IgG (+/-) e IgA (+/-), IgM (+) - proceso agudo;
5. IgM (-), IgA (-), IgG (+) - inmunidad postinfecciosa;
6. IgM, IgG, IgA (+) - patología crónica en fase aguda.

Por ejemplo, si el detectado eran IgG y IgM, el paciente puede tener una de estas enfermedades:

• hepatitis viral;
• citomegalovirus;
• herpes;
• la varicela;
• clamidia;
• estafilocócica o infección estreptocócica.

inmunoensayo enzimático se prescribe a menudo para estudios hormonales, las reglas se muestran en la siguiente tabla:

El nombre de la hormona	Paul	norma
1	tiroglobulina	m / f	Para 70 UI / ml
2	tiroxina	m / f	64-146 nmol / L
3	triyodotironina	m / f	1.8 a 2.8 nmol / l
4	tiroxina libre	m / f	11-25 pmol / L
5	triyodritonin libre	m / f	pmol 4,49-9,3 / L
6	La testosterona, dihidrotestosterona	F	0,5-10 mUI / l

análisis ELISA - es una prueba de diagnóstico que evalúa la probabilidad de cáncer. Sin embargo, la interpretación de los resultados se lleva a cabo únicamente por el médico tratante.

Los resultados de pruebas de significancia

ELISA para la detección de diversas formas de infecciones de transmisión sexual, incluyendo la sífilis, y se utiliza a menudo para el cribado de mujeres embarazadas.

A través de este estudio se puede aprender de la infección y la etapa de la enfermedad en el momento del estudio:

• inmunoglobulinas M decir acerca de la duración de la enfermedad;
• IgA - el paciente está infectado con el de hace más de 30 días;
• IgG se encuentra en la enfermedad "pico", o en un momento cuando el tratamiento recientemente terminó.

Los pocillos de estudio en el plato con un índice negativo son incoloros y positivo pintado de color amarillo brillante. Si el color de los pocillos positivos es diferente del color del control, el resultado se considera dudosa y debe ser re-estudio.

Ensayo inmunoabsorbente ligado a - es el primer paso en el diagnóstico de VIH. Un análisis no puede ser inmediatamente después de la presunta infección debe esperar el final del periodo de incubación (de 14 días a 6 meses).

Durante el análisis de anticuerpos contra el VIH-1 y VIH-2, hay una búsqueda en la clase G, que generalmente aparece en etapas posteriores y en la clase A y M, se pueden definir en las primeras etapas (durante la incubación período).

seguido tras la recepción de muestras positivas:

• Si la primera prueba fue positiva, la sangre volvió a comprobar de nuevo por otro auxiliar de laboratorio;
• un segundo resultado positivo sugiere material de resit
• el resultado repetición, la paciente se le asigna inmunotransferencia.

La conclusión final sobre la presencia de la infección por VIH se expedirá sólo después el resultado de la inmunotransferencia.

ELISA también se utiliza como un estudio de diagnóstico de la tuberculosis, pero si el paciente ha tenido incluso anticuerpos para esta enfermedad, no es siempre confirma la presencia de su tuberculosis, por lo que el EIA se utiliza a menudo como un método de especificar ya sea el mismo para el diagnóstico de extrapulmonar latente formulario.

análisis ELISA - se trata de un estudio que permite detectar un paciente infectado con parásitos y protozoos, en el curso de diagnóstico se puede determinar incluso el momento de la infección.

clamidia	citomegalovirus	alimañas
IgM Detecta 7 días después de la infección,	IgM detectada 30-45 días después de la infección o durante la reactivación de la infección durante 4-6 meses	El estudio determinó IGME. IgG fase crónica de la infección
IgA - infección se produjo hace más de 30 días
IgG - invasión es en la fase aguda
IgG - confirma el diagnóstico y muestra eficacia

Pros y contras análisis

IFA tiene muchas ventajas, lo que explica su popularidad entre los médicos y los pacientes, es:

• de alta precisión del resultado,
• precio razonable,
• resultados rápidos,
• revelando la etapa de la enfermedad,
• el control de la dinámica de la enfermedad.

Sin embargo, en existe un par con las ventajas y desventajas - en casos raros, el análisis es negativo falso positivo o falso.

¿Por qué el resultado puede ser engañosa

pueden ocurrir como resultado debido a violaciónes técnicos errores, el mismo análisis no es fiable en las personas con algunas enfermedades crónicas (factor reumatoide) para el que la característica es el desarrollo de específica anticuerpos.

También en el resultado final se ve influida por el uso de los trastornos del metabolismo de los medicamentos y los pacientes. Por estas razones, un resultado positivo para el VIH y la patología del cáncer requiere pruebas de re-puesta en marcha.

El costo del estudio

IFA precio varía dependiendo de las áreas de diagnóstico (rub.):

• hepatitis 250 -900;
• Virus - 250 -1000;
• VIH - 250-350;
• infestación de gusano - 280 - 900;
• Sífilis -150 a 250;
• infecciones por hongos 400-500.

Ensayo de inmunoabsorción ligado sangre es uno de los métodos más eficaces de la investigación de muchas patologías virales, infecciones parasitarias, patologías oncológicas. Tal investigación como el IFA facilita en gran medida la declaración diagnóstico, sin embargo, este análisis no debe interpretarse de forma independiente por el paciente, debe ser acoplado en el desciframiento de un médico.

Autor del artículo: Bacio

El registro del artículo: Lozinski Oleg

Video del ensayo ELISA

¿Cómo es el análisis ELISA: