Diagnóstico de PCR. ¿Qué hay en la ginecología, la hepatitis, la tuberculosis. pruebas Descifrando como pase, el costo de

En la mayoría de los casos, los pacientes tienen que hacer frente a una situación de este tipo, cuando el examen o determinación requiere el diagnóstico de enfermedades de PCR. Es importante entender lo que es y lo que se necesita.

reacción en cadena de la polimerasa (PCR) - es un estudio que ayuda a identificar muchas enfermedades en las primeras etapas de desarrollo. Su esencia radica en encontrar un presente de ADN o ARN en un patógeno organismo. PCR para determinar el agente causal en los casos en que otros tipos de estudios son ineficaces.

¿Por qué el diagnóstico por PCR es tan popular?

La popularidad de este método radica en su simplicidad y la amplitud de su uso. Es utilizado por los médicos para diagnosticar diversas enfermedades. Se le permite llevar a cabo de forma rápida y cuantitativa compleja investigación genómica.

Uno de los métodos PCR clásica aplicaciones médicas más importante es la detección de microorganismos, que puede causar condiciones patológicas.

La esencia del análisis PCR

diagnóstico de PCR (se explica la biología molecular) es un método de clonación molecular utilizada para análisis de secuencia de ADN corto que está presente en cantidades mínimas en muestras que contienen un genética material. Este método se refiere a menudo como "DNA copiadora."

diagnóstico PCR realizadas in vitro (fuera del cuerpo) en el laboratorio, y basándose en el proceso natural de duplicar ADN antes de su división. Además de ser capaz de detectar los virus, bacterias u otros microorganismos en la muestra, la PCR permite la identificación de su cantidad.

En enfermedades tales como la infección con virus de la hepatitis C o el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), el virus carga es una buena indicación de en qué etapa de la enfermedad y cómo es eficaz la terapia.

Armado con esta información, los médicos pueden determinar cuándo iniciar el tratamiento y para supervisar el proceso. Esto le permite realizar un enfoque individual a cada paciente.

diagnóstico PCR comprende tres etapas, en cada una de las cuales aumenta el número de ADN diana de manera significativa. Como resultado de tal reacción se obtiene más de mil millones de copias de la original, o ADN "diana", que permite evaluar la presencia del virus en el cuerpo. Esta es la característica básica del método de PCR.

Ventajas y desventajas del método

diagnóstico PCR (lo que se ha descrito anteriormente) se ha descrito en detalle Kerry Mullis en 1983. Dado que el método es muy popular en el laboratorio.

Las principales ventajas de este tipo de investigación es:

• versatilidad;
• la velocidad de los resultados;
• una alta probabilidad de obtener resultados fiables;
• especificidad;
• variedad de enfermedades, que puede ser determinada.

La versatilidad del método de PCR es la capacidad de usar cualquier material fisiológico humano. Ni un pelo lo suficiente para su análisis.

El proceso de tratamiento de la información, a través de la automatización, puede tardar varias horas. La especificidad es asignar un fragmento de ADN específico que es característico de un patógeno particular. Utilizando el análisis de PCR de muchas enfermedades puede ser diagnosticada como siendo aumentado, y la etapa latente del flujo.

Pero, a pesar del gran número de ventajas, método de diagnóstico PCR tiene algunos inconvenientes:

• la probabilidad de resultados positivos falsos;
• alta sensibilidad;
• la variabilidad de los microorganismos.

El principal inconveniente del método es la incapacidad para distinguir entre PCR microorganismos vivos de muertos. Por lo general, esto se refiere a una situación en la que debe evaluar el éxito del tratamiento. En este caso, si la enfermedad es tratada, las células muertas son todavía algún tiempo en el cuerpo humano y su actualización completa requiere un tiempo de 4 a 6 semanas.

De alta sensibilidad es una ventaja y al mismo tiempo una desventaja. Algunos microorganismos están presentes en pequeñas cantidades en el cuerpo. Por lo tanto, en este caso, este método de diagnóstico no es informativo, y aconseja el uso de otros tipos de investigación.

Cualquier microorganismos pueden mutar. E incluso a pesar del hecho de que el fragmento específico utilizado en el proceso de amplificación que Menos sujeta a cambios, todavía puede adquirir mutaciones y se convierten en invisibles para sistemas de prueba. Esta situación se explica por el hecho de que una variedad de pruebas de laboratorio del sistema puede mostrar resultados completamente diferentes.

¿En qué áreas del método

estudio PCR se puede utilizar en la práctica clínica para la identificación de diversas enfermedades. Ampliamente utilizados en ginecología, urología, gastroenterología, oncología, etc.. Además, se utiliza con eficacia en medicina forense para identificar y establecer la paternidad.

Este tipo de investigación se utiliza en la fase de planificación y durante el embarazo. Análisis de TORCH-infección se lleva a cabo para detectar la presencia de infección en las mujeres. Las enfermedades causadas por una de las infecciones pueden ser forma leve de la mujer, pero que causa defectos de nacimiento graves del feto, hasta su muerte.

También diagnóstico método PCR ayuda a identificar una predisposición genética a desarrollar ciertas enfermedades en el futuro.

Lo que trae el diagnóstico de infección por PCR

PCR ayuda a identificar los virus, bacterias y hongos.

Las enfermedades más comunes que se pueden diagnosticar con ella:

• enfermedades infecciosas neurológicas (meningitis, mielitis);
• neoplasias (leucemia, linfoma);
• enfermedades virales (VIH, virus del papiloma humano, citomegalovirus, enterovirus, virus de la hepatitis, rubéola, adenovirus y col.);
• infecciones bacterianas;
• infección de transmisión sexual (ureplazmoz, clamidia, tricomoniasis);
• enfermedades causadas por hongos (candidiasis, micoplasmosis);
• herpes;
• enfermedad de Filatov;
• la tuberculosis, la neumonía, difteria, tanto virales como origen bacteriano;
• úlceras gástricas, H. pylori infección provocada por otros.

¿Cuáles son los materiales biológicos investigados

Dada la enfermedad, los síntomas, y la investigación objetivo de diagnóstico PCR puede utilizar cualquier naturaleza líquida o fisiológica de un trozo de tela.

Esto puede ser:

• la sangre;
• la saliva;
• flema;
• orina;
• heces;
• hisopo orofaríngea;
• rebanada del tejido afectado;
• líquido sinovial;
• raspado de la vagina en las mujeres o la uretra en los hombres;
• eyacular;
• cabello y otros.

En las enfermedades del sistema genitourinario se toma hisopo de orina de la vagina en las mujeres o la uretra en los hombres. La sangre venosa alquilado para el diagnóstico de enfermedades tales como VIH, hepatitis tipo, TORCH-infección.

Con el fin de descartar o confirmar la oncología, durante la cirugía son piezas quitadas de tejido para una biopsia.

¿Cómo se prepara para el análisis

Especialmente preparados para el estudio depende del biomaterial, que se da por vencido. Además, tenga en cuenta que es necesario eliminar la recepción de antibióticos y otros medicamentos. Para monitorizar la eficacia del tratamiento debe soportar intervalo después de la recepción de los medicamentos durante al menos 4 semanas.

alquiler de sangre por la mañana con el estómago vacío. La orina y las heces se deben colocar en el diseñado para este, envase absolutamente estéril. Por lo tanto, antes de recoger la orina es necesario llevar a cabo la higiene órganos genitales externos.

Si usted alquila un frotis, es necesario:

• no orinar durante 3 horas;
• no se recomienda lavar y una ducha vaginal el día anterior (para las mujeres);
• por día para detener la vida sexual;
• las mujeres de Papanicolaou deben tomar en la mitad del ciclo.

etapas de análisis de PCR

Antes del inicio de la PCR, el ADN debe ser aislado de la muestra. Aislamiento de ADN es un proceso de múltiples pasos que se pueden realizar manualmente o instrumentalmente.

Después de la preparación de la muestra comienza proceso de etapa de PCR:

• separación de ADN diana (desnaturalización);
• la amplificación (multiplicación) de fragmentos de ADN;
• detección (identificación) de los fragmentos de ADN amplificados.

La primera fase de PCR se llama desnaturalización. Su esencia es que el tubo con la muestra de ADN se calienta a una temperatura elevada (aproximadamente 90 grados). Debido a las altas temperaturas destruido los enlaces débiles entre los nucleótidos que forman código moléculas. El resultado es la separación del DNA de doble cadena o de ARN en dos hebras separadas.

Para el estudio de investigación biomaterial "pureza" acumular solución especial que disuelve las sustancias orgánicas. La duración de esta fase depende del tipo de material y el patógeno.

diagnóstico PCR (lo que se ha descrito anteriormente) en la segunda etapa realiza la multiplicación de los fragmentos de ADN sobre la base de la mayoría de la infección de ADN. PCR no copia todo el ácido nucleico en la muestra. Se copia sólo la secuencia específica del código genético, un fragmento corto (cebador).

En la segunda fase se enfría el tubo. El proceso completo se automatiza usando una máquina de PCR, llamado ciclador o termostato, y se puede completar en unas pocas horas. máquina de PCR se programa para cambiar la temperatura de la mezcla de reacción cada pocos minutos. Esto sucede con el fin de fragmentos cortos podría entrar en contacto con el molde de cadena sencilla.

La amplificación se produce en 30-40 ciclos. Durante este período, asistente de copias médico el fragmento de ADN y aumenta el número de método de reacción en cadena. Por lo tanto, con cada ciclo, el número de copias aumenta a varios millones o incluso miles.

En la tercera fase del estudio no es la identificación de la presencia del ADN de virus y bacterias. Esto se logra mediante la distribución de la mezcla resultante y añadiendo a la misma una solución especial. Este líquido permite que los fragmentos de ADN para adquirir una cierta coloración bajo la acción de los rayos ultravioleta. Esto es una indicación de que las bacterias patógenas están presentes en el cuerpo humano.

PCR durante el embarazo

diagnóstico PCR (lo que se ha descrito anteriormente) se pueden administrar por primera vez durante el embarazo, como es obligatorio. Este método ayuda a identificar la infección oculta y la amenaza de malformaciones en el feto.

Para el análisis usando:

• torunda vaginal;
• la sangre venosa;
• orina;
• líquido amniótico y tejido de la placenta;
• líquido espinal o conjunta.

No naturaleza infecciosa de la enfermedad, que puede afectar negativamente el desarrollo del feto, causando defectos, provocar partos prematuros y abortos involuntarios. Son especialmente peligroso en el primer trimestre y en la mayoría de los casos, es una indicación médica para el aborto. Estas infecciones tienen un nombre común TORCH-complejo.

El análisis de PCR ayuda a establecer la presencia o ausencia de infección en mujeres embarazadas. A menudo llevado a cabo en la etapa de planificación del embarazo o en el primer trimestre. En el caso de un resultado positivo, se necesita repetir el estudio. Fue sólo después de la confirmación de los resultados después del tratamiento.

PCR para el diagnóstico de VIH

método de PCR para el diagnóstico de la infección por VIH es el análisis costoso y se utiliza para indicaciones especiales. Estos incluyen la donación, así como que puede ser administrado a pacientes que han sufrido un accidente de tráfico con las personas, los portadores del VIH.

PCR ayuda a establecer la presencia de la infección en las primeras etapas antes de que el cuerpo ha desarrollado anticuerpos contra el VIH. El resultado es un alto porcentaje de estudio de probabilidad puede mostrar dentro de 5-14 días después de la penetración del virus.

En otros casos, la presencia del virus en el cuerpo humano ayuda a establecer ensayo imunnofermentny (ELISA). Define los anticuerpos del VIH en la sangre humana que comienza a producir en 1-3 meses después de la infección. La determinación cuantitativa del análisis de microorganismos es necesario controlar el tratamiento de los pacientes.

PCR para el diagnóstico de hepatitis

virus de la hepatitis C es una enfermedad grave que puede conducir al desarrollo de cirrosis. El período de incubación, que puede ser de hasta 12 meses, el virus no se manifiesta, el paciente prácticamente no es contagiosa, y el virus no puede ser identificado mediante análisis de sangre de rutina.

Muy a menudo, cuando el tratamiento prematura, la enfermedad se vuelve crónica y amenazado por múltiples complicaciones.

Tras la infección con hepatitis B, el período de incubación es largo, y no los primeros síntomas se puede observar después de sólo 4 semanas. Fue durante este período de ELISA puede mostrar la presencia del virus en el cuerpo.

PCR permite:

• para identificar la enfermedad en una etapa de incubación de desarrollo;
• permitir análisis cuestionables de otros estudios;
• para evaluar la eficacia de la terapia antiviral.

La ausencia de ADN-HBV llevó a cabo después del tratamiento - un signo de su eficacia.

Ensayo para la tuberculosis

Desarrollo provoca bacilo de la tuberculosis tubérculo que puede entrar en el cuerpo humano a través de gotitas suspendidas en el aire. La enfermedad tiene dos formas: encubiertas y abiertas. En el primer caso, una persona infectada no es un portador de la infección y micobacterias en esputo no puede ser detectado incluso por PCR. El peligro de esta forma aún tiene, como puede ser transferido a un escenario abierto.

Abrir el paso (activo) es un peligro para los demás, incluso en el caso de la estricta observancia de las normas de higiene personal. Para el diagnóstico de la enfermedad utilizando fluorografía, y la tomografía de rayos X del tórax. También se utiliza para este muestra de piel tuberkulirovannuyu propósito (prueba de Mantoux). Pero el método más eficaz de la investigación es la PCR.

En uso como las muestras de ensayo:

• la sangre;
• flema;
• líquido bronquios.

PCR para el diagnóstico de VPH

El diagnóstico de HPV lleva a cabo en caso de síntomas tales como papilomas y verrugas en el área genital. El estudio también asigna en la etapa de planificación del embarazo en el caso de infertilidad, abortos involuntarios, y también en una situación de infección de uno de los socios, así como uno de los mecanismos de transmisión - sexual.

El más peligroso no es la misma presencia del virus en el cuerpo, y su tipo. Algunos de sus tipos (16 y 18) son de alto riesgo y pueden causar cáncer de cuello uterino en las mujeres. El método de PCR se puede administrar en conjunción con otros tipos de investigación. Para analizar el hisopo más comúnmente usado de los órganos genitales. Sangre, orina y secreciones vaginales como biomaterial utilizado en muy raras ocasiones.

herpes

Esta prueba diagnósticos infección genital por los virus del herpes simple 1 y 2 (HSV-1 / HSV-2). Con un resultado positivo, HSV2, debe ser probado para el VIH y otras enfermedades de transmisión sexual. Para el análisis requiere sangre venosa del paciente. También puede investigarse la orina, el aislamiento y el contenido erupciones cuando los síntomas.

selección por PCR integrada

En el caso de la lectura o ensayos de PCR complejas pueden ser asignados con el fin de prevenir enfermedades. Lo más a menudo el iniciador sirve el paciente, hay casos en los que un examen completo está indicado para la prevención de los brotes de ciertas enfermedades en una región particular.

PCR-12 - es un estudio integral que abarca las siguientes infecciones:

1. La hepatitis.
2. VIH.
3. Herpes.
4. Enfermedades de transmisión sexual.
5. La tuberculosis.
6. Encefalitis.
7. Candidiasis.
8. la infección por Helicobacter.
9. Citomegalovirus.
10. Mononucleosis.
11. Oncovirus.
12. La listeriosis.

análisis de PCR de transcripción

Después del análisis de PCR resultado positivo o negativo puede ser sonado.

En el caso de un resultado positivo, se recomienda reanudar las pruebas y estudio cuantitativo de PCR. Esto ayuda a determinar la concentración de las infecciones en el cuerpo para el nombramiento de un tratamiento adecuado.

La exactitud de diagnóstico PCR

En la mayoría de los casos, el diagnóstico de PCR proporciona resultados muy precisos. Sin embargo, en algunos casos, para confirmar la exactitud del diagnóstico requiere métodos de investigación adicionales.

A causa de lo que puede conseguir un resultado falso?

Los resultados falsos positivos pueden ser obtenidos como resultado de la recopilación y el análisis de los procedimientos más investigación inadecuada.

El paciente puede ser el culpable de contenido de información falsa en el caso de una preparación inadecuada para la entrega de biomaterial. laboratorios equipados y médico profesional puede afectar directamente a los resultados del estudio.

Dónde ir diagnóstico de PCR

PCR diagnóstico se realiza en clínicas privadas y laboratorios para una cita con el médico o por iniciativa del paciente con el propósito de la prevención. Se debe dar preferencia a las clínicas y laboratorios con equipos modernos, que no es el primer año en el mercado médico y han demostrado su eficacia.

análisis de PCR: coste y el tiempo

Este método de diagnóstico de alto valor es diferente. Su precio oscila entre 200 a 500 rublos para cada especie. estudio exhaustivo de la presencia de múltiples infecciones puede ahorrar dinero de manera significativa, en comparación con el pago de cada estudio individual.

El período de la investigación depende del tipo de infección, y puede tomar de 1 a 5 días. Además, estas cifras dependen del equipamiento de los laboratorios y la formación de los profesionales de la medicina.

diagnóstico de PCR (que se describe en detalle en este artículo) es el método más preciso y rápido para el estudio. Es uno de los descubrimientos más importantes del siglo XX. en el campo de la medicina.

Con este método se hizo posible curar muchas enfermedades. Pero no se olvide que la PCR tiene algunas desventajas, y su eficacia se eleva a veces en combinación con otros métodos.

El registro del artículo: Vladimir el Grande

Videos sobre el diagnóstico de PCR

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