Wassermanova reakcija (RW). Kakva je to analiza, kako je uzeti, koliko se na vrijeme učini

Godine 1906. g. imunolog i mikrobiolog njemačkog porijekla A. NS. von Wassermann u suradnji s A. L. S. Neisser je razvio test za dijagnoza sifilisa. Ovo je reakcija koja otkriva prisutnost antitijela na uzročnika bolesti. Trenutno se klasični istraživački pristup slabo koristi, ali sve metode usmjerene na identifikaciju bolesti nazvane su po njezinu tvorcu.

Bit analize

Sifilis je spolno prenosiva bolest zarazne prirode. Uzrokuje ga blijeda treponema, a karakterizira ga periodični tijek, oštećenje sluznice, kože, mišićno -koštanog sustava i unutarnjih organa.

Ima sljedeće putove prijenosa:

• Seksualni: najčešći je.
insta story viewer
• Kontakt-kućanstvo: djeca od roditelja sa sifilisom zaraze se na ovaj način.
• Transfuzija: nakon transfuzije krvi i njezinih sastojaka od davatelja s uzročnikom u tijelu.
• Transplacentalni: prenosi se na fetus kroz posteljicu od majke tijekom trudnoće.
• Profesionalno: medicinsko osoblje se inficira pri obavljanju manipulacija sa osobama zaraženim blijedom treponemom: kirurzi, opstetričari-ginekolozi, stomatolozi.

Uzročnik bolesti ostaje aktivan u svježim izlučevinama zaražene osobe, poput sline, urina i drugih fizioloških tekućina.

Po obliku sifilis se dijeli na:

• Primarni. Javlja se nakon infekcije s blijedim treponemom. Razdoblje inkubacije je 6-8 tjedana od trenutka infekcije. Karakterizira ga ulcerativna formacija na mjestu uvođenja patogena, povećanje submandibularnih ili ingvinalnih limfnih čvorova. Pozitivna reakcija dijagnosticira se u 8 od 10 slučajeva.
• Sekundarni. Karakterizira blijedi osip po cijelom tijelu, uključujući dlanove i plantarne površine, simptomi opijenosti, karakteristični za respiratornu infekciju. Otkriva se u gotovo 100% slučajeva.
• Tercijarni. U 1/3 pacijenata RW test daje negativan rezultat. U bolesne osobe zahvaćen je koštani kostur, uzrokujući njegovu deformaciju, unutarnje organe i živčani sustav.
• Bakterije prijenosnici. Osoba se zarazi blijedom treponemom, snažna imunološka reakcija tijela potiskuje njegovu aktivnu reprodukciju, ali ne može potpuno uništiti infekciju. U ovom slučaju nema simptoma bolesti, ali je nositelj opasan za ljude s kojima dolazi u kontakt.

Wassermanova reakcija je serološka studija koja se provodi ekspresnom metodom. Njegov drugi naziv: test krvi za RW. Proučavanje materijala za sifilis temelji se na identifikaciji specifičnih protutijela koja se proizvode imunološki sustav ljudskog tijela kao odgovor na invaziju stranih antigena u krvotok, uzrokujući ih smrt.

Uzročnik bolesti sadrži nespecifični protein zvan kardiolipin. Medicinska industrija dobiva ga iz srca goveda i pušta ga gotovog, s uputama. Prilikom provođenja studije to se dodaje u epruvetu koja sadrži biološki materijal (serum). antigen, tvoreći snažne veze između antitijela i proteina urođene imunosti (komplementa) krvi pacijent. Zatim se pripravak podvrgne hemolizi, nakon čega se ocjenjuju rezultati.

Analiza za RW ukazuje i popravlja autoimuni proces koji je u ljudskom tijelu pokrenuo treponema pallidum.

Krv za istraživanje uzima se samo iz venske žile u količini od 5-10 ml. Manipulacija se provodi u uvjetima prostorije za liječenje poliklinike, dijagnostičkog centra ili bolnice.

Što može pokazati?

RW test temelji se na odgovoru vezanja komplementa. Njegova svrha: identificirati antitijela na uzročnika bolesti.

Testiranje na sifilis pomaže:

• Za postavljanje dijagnoze bolesti u njezinoj prvoj fazi.
• Odredite trajanje infekcije.
• Otkrijte infekciju u latentnom (latentnom) toku bolesti.
• Pratite liječenje.
• Pregledajte osobe koje su u kontaktu s bolesnom osobom za prijenosnika patogena.

Indikacije za istraživanje

Wassermanova reakcija je krvni test koji se provodi za dijagnozu i pregled sljedećih skupina ljudi:

• Medicinski radnici i bolničko osoblje.
• Ljudi povezani s hranom (uzgoj, prodaja, prerada): rade u predškolskim i školskim ustanovama.
• Osobe koje su po zanimanju u kontaktu sa zagađenim materijalom.
• Donatori fizioloških materijala tijela.
• Zaraženi HIV-om, ovisnici o drogama i vode asocijalni način života.
• Pacijenti koji se liječe u bolnici, kao i oni kojima je propisana operacija.
• Uz dugotrajnu groznicu nepoznatog podrijetla.
• Nositelji vana u sanatoriju.
• Trudnice se pregledavaju nekoliko puta tijekom cijelog razdoblja.
• Novorođena djeca za identifikaciju kongenitalnog sifilisa.
• Nakon odnosa sa slučajnim poznanikom bez upotrebe zaštitne opreme (kondoma).
• Ako sumnjate na infekciju treponemom: čirevi u genitalnom području, povećani limfni čvorovi, kožni osip.
• Prilikom godišnjeg liječničkog pregleda.
• Za pacijente koji se podvrgavaju liječenju sifilisa, za praćenje dinamike bolesti i učinkovitosti liječenja radi njegove pravodobne korekcije.

U razdoblju rađanja djeteta

Trudnicama se propisuje krvni test za RW 3 puta:

1. Kada se prvi put prijavite za trudnoću i registraciju.
2. U 13 tjedana trudnoće.
3. Po prijemu u bolnicu.

Žena koja je imala sifilis trebala bi se suzdržati od začeća djeteta 5 godina. Trebali biste znati da je Wassermanova reakcija pri nošenju fetusa u 1,5 od 100 trudnica lažno pozitivna. Stoga liječnik propisuje drugu analizu. Nakon potvrde infekcije treponemom, pacijentica treba liječenje kako bi zaštitila fetus od infekcije i spriječila intrauterinu smrt.

Koliko dana traje analiza?

Wassermanova reakcija je metoda koja se odnosi na ekspresnu dijagnostiku za identifikaciju uzročnika sifilisa. Studija na klasičan način provodi se tijekom dana, nakon čega liječnik prima podatke analize. Izuzetak su područne poliklinike. Zbog udaljenosti od laboratorija dermatovenoznog dispanzera, na analizu će se morati pričekati do 2 tjedna (to je zbog činjenice da se materijal transportira i rezultati dostavljaju u određene dane).

Danas se široko koristi PCR metoda (lančana reakcija polimeraze). To je točna studija za identifikaciju uzročnika bolesti. Njegova pouzdanost doseže gotovo 100%. Rezultat je poznat nakon 5 sati. nakon uzimanja biološkog materijala. Nedostatak: visoka cijena. Stoga je analiza dostupna privatnim klinikama.

Koliko dugo analiza vrijedi?

Trajanje pouzdanosti rezultata za reakciju RW ne prelazi 3 mjeseca. Najčešće se analiza provodi tijekom preventivnog liječničkog pregleda jednom godišnje. Treba napomenuti da se tijekom razdoblja inkubacije patogen ne može otkriti, jer krv sadrži vrlo malu količinu antitijela. Pozitivan test moguć je 4 tjedna nakon prodora blijede treponeme u ljudsko tijelo.

Priprema za analizu

Wassermanova reakcija jedna je od laboratorijskih metoda istraživanja i zahtijeva ispunjenje potrebnih uvjeta u pripremi za prikupljanje biomaterijala. To je potrebno kako bi se uklonile pogreške koje utječu na rezultat.

Prije ispitivanja krvi na RW, potrebno je uzeti u obzir sljedeće čimbenike:

• Krv se uzima u prvoj polovici dana strogo natašte ili bi uzdržavanje od jela trebalo biti unutar 6 sati, budući da na pouzdanost utječu enzimi probavnog sustava.
• Dan prije pregleda ne smijete konzumirati: kavu i napitke s kofeinom, voćne sokove, masnu hranu, alkohol. Morate se suzdržati od duhana neposredno prije vađenja krvi.
• Ne preporučuje se uzimanje lijekova 24 sata, osobito onih koji sadrže digitalis i antibiotike. Liječnika treba obavijestiti o vitalnim lijekovima kako bi to mogao uzeti u obzir pri dekodiranju rezultata.
• Uoči uzimanja analize mora se suzdržati od fizičkog, emocionalnog stresa.
• Možete piti vodu bez plina ili prokuhanu.

Kako se postupak provodi

Za provjeru osobe na prisutnost patogena blijede treponeme u tijelu potrebna je krv uzeta iz vene.

Redoslijed:

1. Tijekom prikupljanja materijala pacijent mora ležati ili sjediti.
2. Preko ruke iznad lakta navuče se medicinski podvez.
3. Mjesto budućeg uboda tretira se ubrusom namočenim u 70% alkohola.
4. Igla je umetnuta u vensku posudu i spojena na vakuumsku cijev. Uz pomoć vakuuma izvlači se 5-10 ml krvi.
5. Nakon ubrizgavanja, rana se pritisne materijalom koji sadrži alkohol. Kako bi se spriječilo krvarenje, ruka je savijena u laktu na nekoliko minuta ili medicinska sestra nanese čvrsti zavoj za fiksiranje.
6. Prilikom analize kod djece mlađe od godinu dana koriste se vene na djetetovoj glavi.
7. Epruveta s krvnom masom šalje se u laboratorij radi ispitivanja antitijela na patogen. Skladištenje se čuva u hladnjaku ne više od 48 sati.

Tehnika istraživanja:

1. Serum se odvaja od uzete krvi centrifugiranjem.
2. Podijeljen je u 3 dijela, od kojih je jedan kontrolni, a druga 2 se ubrizgavaju s kardiolipinskim antigenom. Zatim se epruvete stave u termostat s temperaturom od + 37 ° C na 1 sat, tijekom čega se stvaraju snažne veze u biološkom materijalu između antitijela i injektiranog lijeka.
3. Sastav podliježe hemolizi pomoću kemikalija. Nakon 30-60 minuta. procijeniti: negativan rezultat dokazuje uništavanje i hemoliza eritrocita. Odsutnost ili usporavanje reakcije u usporedbi s kontrolnim uzorkom ukazuje na pojavu reakcije vezanja antitijela na antigen. Stadij bolesti procjenjuje se prema vremenu odgode.

   

Rezultati analize šalju se liječniku koji je propisao pregled ili se dijele pacijentu kada samostalno odlaze u medicinski laboratorij.

Vjerojatnost pogreške u rezultatima

Pogreška doseže 10-20% slučajeva.

Povezan je sa:

• Prisutnost somatskih bolesti koje utječu na sastav krvi.
• Karakteristike ljudskog tijela.
• Prisutnost latentnog tijeka sifilisa, koji je u kombinaciji s drugom patologijom.
• Pacijent zanemaruje preporuke prije uzorkovanja.
• Nedovoljna osposobljenost laborantica: pogrešne radnje pri uzimanju krvi, skladištenju i transportu.
• Upotreba reagensa kojima je istekao rok trajanja.
• Neravnomjerna raspodjela antigena u epruveti, nekorištenje kontrolnih uzoraka krvi u ispitivanju materijala.

Na izobličenje rezultata mogu utjecati i bolesti zarazne prirode: leptospiroza, povratna groznica, borelioza uzrokovana ubodom krpelja, neke tropske bolesti Latinske Amerike, Afrike (pinta, bejel). Njihovi patogeni slični su po antigenima treponemi pallidum. U studiji daju lažno pozitivnu reakciju.

Dekodiranje

Wassermanova reakcija je tehnika za otkrivanje blijede treponeme u ljudskom tijelu, koja se temelji na odgovoru njegovog imunološkog sustava na invaziju proteina sličnog sastava s antigenom uzročnika sifilisa. Negativan rezultat (negativan) ukazuje na odsutnost bakterija u krvi pacijenta i označen je znakom “-” (minus). Pozitivna se piše znakom "+" (plus).

Pozitivna Wassermanova reakcija

Pozitivna RW ukazuje na to da je u serumu ljudske krvi pronađen kardiolipin, antigen treponeme.

To je moguće pod sljedećim uvjetima:

• Pacijent je bolestan od sifilisa.
• Test je dao lažno pozitivnu reakciju.
• S antifosfolipidnim sindromom.
• Unutar godinu dana nakon liječenja sifilisa.

U tom slučaju uvijek se dodjeljuje ponovno ispitivanje radi otkrivanja antitijela na patogen i drugih dijagnostičkih metoda.

Ovisno o vremenu odgode reakcije hemolize, rezultat testa tumači se na sljedeći način:

Količina "+"	Reakcija	Hemoliza eritrocita u vremenu	Broj patogena
++++	Jako pozitivno	Nije bilo znakova	Jako veliko
+++	Pozitivan	Značajno kašnjenje	Značajan
++	Slabo pozitivan	Djelomično	Mali
+	Sumnjivo	Beznačajno	Vrlo malo ili je rezultat pogrešan

Pacijent se uklanja iz registra nakon tri uzastopne studije na prisutnost patogena, analize cerebrospinalne tekućine i pregleda od strane liječnika: oftalmologa, neurologa i otolaringologa.

Wassermanova lažno pozitivna reakcija

Lažno pozitivan RW može biti potaknut poremećajem endokrinog i imunološkog sustava, prisutnošću teških somatskih bolesti.

Očituje se u sljedećim infekcijama i stanjima:

• Tuberkuloza bronhopulmonalnog sustava.
• Bolesti vezivnog tkiva.
• Zarazne bolesti: vodene kozice, mononukleoza, zaušnjaci, ospice.
• U razdoblju oporavka i nakon cijepljenja.
• Onkologija: limfom, mijelom.
• Hepatitis, ciroza jetre, HIV infekcija.
• Dijabetes.
• Reumatske i autoimune bolesti: sistemski eritematozni lupus, lepra.
• Nakon nedavnog moždanog udara, srčanog udara.
• U slučaju trovanja i opijenosti.
• S brucelozom.
• U žena tijekom menstruacije, trudnoće, unutar 2 tjedna prije i nakon poroda.
• U dojenčadi u prvih 10 dana od rođenja.
• Nakon konzumiranja masne hrane, alkoholnih pića, pušenja.

Također, na pogrešku rezultata utječu napredna dob pacijenta (80+), učestalost transfuzije krvnih komponenti kod hemofilije, leukemije i ubrizganih lijekova.

U slučaju lažno pozitivnog rezultata do "++", potrebna je druga analiza krvi pacijenta. Provodi se nakon nekoliko tjedana ili se koriste druge dijagnostičke metode temeljene na suvremenim laboratorijskim alatima.

Negativna Wassermanova reakcija

Karakterizira zdravu osobu (to se odnosi samo na spolno prenosive bolesti i ne odnosi se na somatske bolesti), koja nije zaražena sifilisom.

Valja napomenuti da je u prva 3 tjedna nakon infekcije blijedom treponemom Wassermanova reakcija pokazala negativan rezultat. To je zbog male količine antitijela u krvi pacijenta. Nakon 1,5 mjeseca pozitivan test se pokazuje u 25% pacijenata. Samo na vrhuncu bolesti pouzdanost se približava 80-90%.

Lažno negativan RW moguć je tijekom razdoblja sivo negativnog prozora u bilo kojoj fazi bolesti, kao i pri uzimanju kapilarne krvi iz prsta.

Koje testove pacijenti dodatno poduzimaju?

Kriterij za ispravnu dijagnozu sifilisa je izolacija uzročnika bolesti ili prisutnost antitijela na njega.

Izravne metode istraživanja uključuju:

• TMP - mikroskopija tamnog polja. Najpouzdaniji dijagnostički pristup. Materijal je iscjedak iz čira, erozija, sadržaj uzeti tijekom probijanja limfnog čvora. U tamnom polju pod mikroskopom pojavljuje se blijeda treponema u obliku spirale. Razlikovanje od drugih sličnih patogena čini se morfologijom bakterije i njezinim karakterističnim kretanjima. Na temelju toga se postavlja dijagnoza.
• Uzajamnog fonda - izravna imunofluorescencija. Koristi se za proučavanje iscjedka iz područja lezija usne sluznice, rektuma, materijala dobivenog tijekom obdukcije, biopsije. Tehnika analize sastoji se u postavljanju uzoraka na stakleno staklo; tijekom fluorescentne mikroskopije, laboratorijski liječnik opaža sjaj jarkozelene svjetlosti.
• PCR - lančana reakcija polimeraze. Tehnologija se temelji na otkrivanju DNK patogena. Izvor je kralježnica, tkivo, amnionska, sjemena tekućina, krv.

Također se koriste reakcije i pregledi kao što su:

• RIF - imunofluorescencija.
• RPHA - pasivna hemaglutinacija.
• RIBT - imobilizacija blijedih treponema.
• ELISA - enzimski imunološki test.
• Imunobloting.

U XX stoljeću. Wassermanova reakcija bila je jedini način dijagnosticiranja i praćenja liječenja pacijenata sa sifilisom. To je jeftina i brza analiza s visokim postotkom točnosti. Trenutno su razvijene nove istraživačke tehnologije koje daju manje nepouzdane rezultate. No neki laboratoriji i dalje koriste ovu tehnologiju zbog njene dostupnosti.

Video o Wassermanovoj reakciji

RW test krvi: