ELISA analiza: što je, dekodiranje krvi imunoenzimski test za parazita, sifilis, HIV-om, i tuberkuloze. Norma u tablici

Zahvaljujući razvoju moderne medicine, liječnik u dijagnostici više ne moraju oslanjati na neizravne manifestacija bolesti ili za obavljanje višefazni laboratorijska istraživanja. Dovoljno je test koji će potvrditi ili opovrgnuti navodnog početnu dijagnozu.

Ovaj postupak je enzimskog imunosorbent testa (ELISA) - ova studija pokazuje specifična antitijela i antigeni svojstvene različitim patologija, što ubrzava uglavnom biljka dijagnoza.

Što je ELISA

ELISA analiza - to takoelaboratornoe studija (postupak), koji pomaže da se odredi prisutnost ili odsutnost određene antitijela u tijelu u borbi protiv virusa i njihov broj.

Temelj studije je prirodna reakcija na antigen (zlonamjerna predmet tijelo) - antitijela (Protein uništava zlonamjernih) koji vam omogućuje da otkrije prisutnost raznih virusa, bakterije.

ELISA je prirodni imunološki odgovor - interakcija protutijela s odgovarajućim antigenom. Tako u IFA u cijev s materijal se naizmjence dodaje antigena ili antitijela, nakon što je detekcija koncentracije nastalih kompleksa antigen-antitijelo.

Ako su nastali podudaranja, onda ima imuni kompleksi nadalje enzimska reakcija odvija s bojanje materijala ujedinjene molekule. To je zbog promjene u boji u toku enzimske naznakom javlja nakon identifikacije razini studija bolest definirana veze.

vrsta imunoglobulina

Ljudski imunoglobulini diferenciraju u nekoliko razreda, različitih svojstava strukture i antigenske karakteristike teških lanaca (H-lanac). Kod svih sisavaca, uključujući i čovjeka, izolirane pet H-lanaca, koji određuju imunoglobulina koji pripadaju odgovarajućem razredu: G, M, A, D, E.

Svaki razred razlikovati jedna od druge biološka svojstva, te sposobnost vezanja antigena, a brzina i veza s molekulom snage.

Funkcije svakog imunoglobulina (Ig) su različiti:

Broj tijela	funkcije	Poluživot (dana)	vrijednost
G	70%	Formiraju pasivni imunitet u novorođenčadi; potrebno za imunološki odgovor poboljšati fagocitozu,	21-24	osigurati dugi humoralni imunitet u zaraznim bolestima
M	5-10%	Moramo aktivirati fagocitozu, mogu vezati antigen 5 molekule	5	Ona pruža primarni imunološki odgovor
	10-15	Neutralizirati toksine i virusa potreban za formiranje ranog imuniteta Formiranje lokalne imunitet	4-5	sluznice obrana
E	0,2%	uzrokuju alergije i anafilaksa aktiviran tkiva bazofili	2	Zaštita od nametnika
D	0,2%	uključeni u razvoj limfocita, potrebno je kao membranskog receptora za antigen;	3	Njihova uloga je malo proučavati

Pojava imunoglobulina događa na nekoj vrsti „lanca» - lgM LGG, te način na koji tijelo reagira na izgled tijela u antigena. U laboratoriju dijagnoza procjenjuje koncentraciju tri glavna imunoglobulina - G, M, A.

Indikacije za isporuku testa imunoglobulina

ELISA analiza postaje sve popularnija svake godine.

Takva istraživanja ubrzava dijagnoze izjavu, što je vrlo važno za liječenje patoloških stanja kao što su:

• virusni hepatitis;
• HIV infekcije;
• citomegalovirus,
• Epstein-Barr virus,
• herpesa,
• ospice
• rubeole,
• tuberkuloza,
• salmoneloze,
• dizenterija,
• krpeljnog encefalitis,
• Bakterije Helicobacter,
• Lajmske bolesti,
• tetanus,
• sifilis,
• difterije,
• leptospiroza,
• klamidija,
• ureaplasmosis,
• mikoplazmoza,
• hripavac.

Ista analiza može identificirati infekcije parazitima:

• flatworms
• Ascaris
• gistolicheskimi amebe,
• tremadami jetre,
• Giardia,
• Toxoplasma,
• Trichinella,
• slučajnost,
• cestodosis.

ELISA je jedinstvena oznaka za autoimune patologije i raka.

Pripravak za isporuku analize

U sklopu priprema za studije trebali pridržavati ovih pravila:

• dan prije uzorkovanja krvi ne može pušiti i piti alkohol,
• da se ne bavi sportom ili drugim fizičkim aktivnostima,
• pokušati izbjeći stres

  

• da se zaustavi korištenje lijekova najkasnije 10 dana prije zahvata.

Isti liječnici preporučuju da se drže na poseban način ishrane - isključiti masne i pržene hrane, a ako Istraživanje provedeno na hepatitis, da ne bi trebali jesti bilo narančasto povrće, a posebno citrusa. Doniranje krvi treba biti ujutro na prazan želudac.

Lažno pozitivna analiza je zbog izvanrednih preporuka, posebice masne hrane, To vodi do prekomjerno visokih koncentracija triglicerida u plazmi, zbog čega je vodljivost ELISA smanjuje.

Postupak za uzimanje uzoraka

U punoj krvi, serumu ili plazmi venske krvi može se koristiti kao test materijala. Ograda materijala, obično provodi s kubitalnom vene se koristi za ovu svrhu jednokratnu iglu i vakuumskoj cijevi, potrebno je 5-10 ml krvi.

Za točne rezultate, važno je pridržavati se odgovarajuće tehnike uzorkovanja - puknuća broda i okolnog tkiva mora biti jedno manipulacije, tako da koristi kratku iglu s većeg promjera, tako da ne ozlijediti suprotni zid vene i nisu oštećeni eritrociti.

Samo da sačuva integritet crvenih krvnih stanica, nužno je da krv kaplje niz stijenke cijevi.

Tijekom skladištenja, materijal treba izbjegavati što je više moguće ionizacije nadalje materijal ne smije biti u kontaktu s ostacima dezinficijensi, tako da se koristi samo za jednokratnu plastičnu bočicu s oznakom pacijenta ime i prezime, datum i vrijeme isporuke materijal.

Ako se želi kratki odlaganje materijala je rashladni komora koristi za temperature od 2-4 ^okoC, ako je potrebno duže skladištenje, materijal je zamrznuta na -20 ^okoS.

Kako napraviti analizu

Nakon pripreme materijala liječnik pomoćnih sredstava za potrebne manipulacije. U tu svrhu, veliki broj posebnih kompleta antigena, poliju vlasništvo izazvati reakciju tijela na stimulus je raznih infekcija, hormona, alergena.

Shema „antigen-antitijelo” očekuje odgovor izgleda ovako:

• Inicijalna reakcija - definirano Ig (Ab) i pročišćen patogena antigen (Ag).
• Za detekciju nastalih imunih kompleksa zatim novi imunološku reakciju na antigen specifični gdje djeluje povezano Ig, te antitijela na strši konyugat- Ig (Ab).
• Posljednja faza - enzimska reakcija, uz katalizator molekula konjugat. Supstrat djeluje kao kromogen (nije obojeno), koji u reakciji u boji, a intenzitet boje je određen kvantitativno i indeks imunoglobulina u uzorku.

Trenutno, razvio široku paletu od ELISA varijante, jasna klasifikacija njih nedostaje. Tipično, postupci se smatraju temeljem svog odvajanja u hetero- i homogena - sve analiza faza odvija pomoću čvrste faze ili pomoću jedino rješenje.

Moderne kliničkim laboratorijima obično koriste dijagnostički heterogenu (krute faze), ELISA, misli se apsorpcije na čvrstoj fazi antigena ili antitijela na krutoj površini posebnih rupa koje se nalaze na metodu polistiren mikroploče je podijeljen u izravne i neizravne ELISA.

U izravnom ELISA, antigen uveo pogrešaka tijekom inkubacije u prazne jažice površina za to test uzorak materijala je smještena u čisti jažice za 20-25 minuta, potrebno je da se vežu na njihove antigen površina. Zatim dodatak željenog antitijela. Nadalje, materijal ostaje određeno vrijeme da se formiraju veze.

Antitijela su uvijek dodaje u suvišku, pa čak i ako se nalazi u uzorku nisu povezane antigene i antigene, ako ne i sve, linkovi neće biti. Vaditi „ekstra” antitijela provodi se slijeganjem, ostavljajući samo one antitijela koja su uspostavila komunikaciju s antigenom.

Nakon toga slijedi enzimske reakcije - dodatak u jažice s enzimske otopine, nakon čega se javlja bojenje izvedene veze.

U indirektna metoda koja se koristi ELISA antitijela u unaprijed spojen na supstrat enzimatske reakcije; U ovom slučaju dolazi do vezanja protutijela na antigen tijekom inkubacije, koja se odvija po mobilizaciju veza na površinske otvore i zatim puni u konjugata i supstrata-dye kromogenim reagentom reakcija.

Dakle, glavna razlika od izravne ili neizravne metode nije značajan za tu veznu površinu čiste bunara, a vezanje na antigen imobiliziran na pločici.

Zaustavlja reakciju pomoću specijaliziranih uređaja, u svaku jažicu je podvrgnut daljnjem postupku fotometrija, nakon čega slijedi komparativna analiza rezultata dobivenih s prethodno provedena kontrola uzorci.

Ako je otkriven je povišenje optičke gustoće u uzorku tada napuhan i koncentracija specifičnih antitijela u rezultat testa.

Kada je analiza je spreman

Studija ne uzima puno vremena od uzimanja krvi da bi dobili rezultat ide od 1 do 10 dana, ovisno o dijagnostičkim mjerama.

Rezultati ispitivanja i njihovo tumačenje

U obliku, što je rezultat dobiven dijagnosticiranje pacijenta ukazuje na negativni ili pozitivni određene klase imunoglobulina, kao što je prikazano kvantitativno mjere različitih klasa antitijela.

Različite interpretacije rezultata:

1. IgM (+) (IgA, IgG se nije detektiran) - proces ozdravljenja;
2. IgM (-) IgG (+), IgA (+) - kronične infekcije patologija;
3. IgM, IgG, IgA (sve s - vrijednost) - bez obrambeni mehanizmi zaraze;
4. IgG (+/-) i IgA (+/-), IgM (+) - akutna procesa;
5. IgM (-), IgA (-) IgG (+) - postinfectious imuniteta;
6. IgM, IgG, IgA (+) - kronične patologije u akutnoj fazi.

Na primjer, ako se otkrije su IgG i IgM, pacijent može imati jedan od ovih bolesti:

• virusni hepatitis;
• citomegalovirus;
• herpesa;
• boginje;
• klamidija;
• stafilokokni ili streptokokni infekcija.

Enzimski imuno često propisane za hormonska ispitivanja, pravila su prikazani u tablici u nastavku:

Naziv hormona	Pavle	norma
1	tiroglobulin	m / ž	70 IU / ml
2	tiroksina	m / ž	64-146 nmol / L
3	trijodtironin	m / ž	8.1.-8.2. nmol / l
4	besplatno tiroksina	m / ž	11-25 pmol / L
5	besplatno triyodritonin	m / ž	4,49-9,3 pmol / L
6	Testosteron dihidrotestosteron	F	0,5-10 mIU / l

ELISA analiza - to je dijagnostički test koji procjenjuje vjerojatnost raka. Međutim, interpretacija rezultata se provodi samo nadležni liječnik.

rezultati Značaj ispitivanja

ELISA za otkrivanje različitih oblika seksualno prenosivih infekcija, uključujući sifilis, a često se koristi za probir trudnica.

Kroz ovu studiju možete naučiti od infekcije i stadiju bolesti u vrijeme studija:

• Imunoglobulini M reći o trajanju bolesti;
• IgA - pacijent zaražen prije više od 30 dana;
• IgG se nalazi na „špici” bolesti, ili u vrijeme kada je terapija nedavno završila.

Studija bunara na ploči s negativnim indeksom su bezbojni i pozitivno obojana u svijetle žute boje. Ako je boja pozitivnih bunara razlikuje od boje kontrole, rezultat se smatra upitan i mora biti ponovno studija.

Imunosorbent testa - je prvi korak u dijagnozi HIV. Analiza ne može biti odmah nakon što se navodna infekcije moraju čekati kraj razdoblja inkubacije (od 14 dana do 6 mjeseci).

Tijekom analize antitijela na HIV-1 i HIV-2, tu je pretraživanje na klase G, koji se obično pojavljuje na kasnijim fazama i AT klase A i M mogu biti definirani u ranim fazama (vrijeme inkubacije razdoblje).

slijedi po primitku pozitivnih uzoraka:

• Ako je prvi test bio pozitivan, krv ponovno rechecked drugi pomoćni laboratorij;
• drugi pozitivan rezultat sugerira Resit materijala
• rezultat ponavljanje, pacijent je dodijeljen imunoupijač.

Konačni zaključak o prisutnosti infekcije HIV-om se može izdati tek nakon što je rezultat imunoblotiranjc.

ELISA se također koristi kao dijagnostička studija tuberkuloze, ali ako je pacijent još ima antitijela na ovu bolest, to nije uvijek potvrđuje prisutnost njegova tuberkuloze, tako da je Studija utjecaja na okoliš se često koristi kao metoda određivanja bilo isto za dijagnosticiranje latentnu izvanplućni oblik.

ELISA analiza - to je studija koja omogućuje da otkrije pacijenta zaraženog s parazitima i protozoa, tijekom postavljanja dijagnoze može se odrediti ni vrijeme infekcije.

klamidija	citomegalovirus	štetočina
IgM Otkriva 7 dana poslije infekcije,	IgM otkrivena 30-45 dana nakon infekcije, ili tijekom infekcije reaktivacije 4-6 mjeseci	Studijom je utvrđeno IgME. IgG kronična faza infekcije
IgA - infekcija dogodila prije više od 30 dana
IgG - invazija u akutnoj fazi
IgG - potvrđuje dijagnozu i pokazuje učinkovitost

Pro i kontra analiza

IFA ima mnoge prednosti, što objašnjava njegovu popularnost među liječnicima i pacijentima, to je:

• visoka točnost rezultata,
• prihvatljive cijene,
• brzi rezultati,
• otkriva stadij bolesti,
• kontrola dinamike bolesti.

Međutim, u rangu sa svim prednostima i nedostatak postoji - u rijetkim slučajevima, analiza je lažno pozitivan ili lažno negativan.

Zašto rezultat može biti pogrešno

Pogreške mogu nastati kao posljedica zbog tehničkih prekršaja, isti analiza je nepouzdana u osoba s neke kronične bolesti (reumatoidni čimbenik) za koje je karakteristično je razvoj specifične antitijela.

Također, na konačni rezultat je pod utjecajem korištenje bolesnika lijekovima i poremećaja metabolizma. Iz tih razloga, pozitivan rezultat na HIV i rak patologije zahtijeva re-puštanje ispitivanja.

Troškovi studija

IFA Cijena varira ovisno o dijagnostičkim područjima (utrljati.):

• hepatitisa 250 -900;
• Virusi - 250 -1000;
• HIV - 250-350;
• crv zaraza - 280 - 900;
• -150-250 sifilis;
• gljivične infekcije 400-500.

Vezan imuno test krvi je jedan od najučinkovitijih metoda istraživanja mnogih virusnih patologija, parazitske infekcije, onkoloških bolesti. Takva istraživanja kao IFA u velikoj mjeri olakšava dijagnozu izjavu, međutim, ova analiza ne trebaju shvatiti samostalno pacijent mora biti angažiran u dešifriranju liječnika.

Autor članka: Bacio

Registracija članka: Lozinskog Oleg

Video u ELISA testom

Kako je ELISA analiza: