Dėka šiuolaikinės medicinos plėtros, diagnozuojant gydytojas nebereikia remtis netiesioginių ligos pasireiškimais ar atlikti kelių pakopų laboratorinius tyrimus. Užteks laikyti testą, kad bus patvirtinti arba paneigti įtariamą pradinį diagnozę.
Šis metodas yra imunofermentinės analizės (IFA) - tai tyrimas atskleidžia specifinius antikūnus ir antigenai neatskiriami patologijų, įvairovė, kuri paspartina daugiausia augalų diagnozė.
Šiame straipsnyje:
- 1 Kas yra ELISA
- 2 tipų imunoglobulinų
- 3 Indikacijos pristatymo branduolinių medžiagų analizės imunoglobulinų
- 4 Pasirengimas gimdymui analizės
- 5 Bandinių ėmimo procedūra
- 6 Kaip padaryti analizę
- 7 Kai analizė yra pasirengusi
- 8 Bandymo rezultatai ir jų interpretacija
- 9 Reikšmė testo rezultatai
- 10 Argumentai "už" ir "prieš" analize
- 11 Kodėl rezultatas gali būti klaidinanti
- 12 Tyrimo kaina
- 13 Vaizdo ELISA bandyme
Kas yra ELISA
IFA analizė - tai takoelaboratornoe tyrimas (metodas), kuris padeda nustatyti buvimą ar nebuvimą tam tikrų antikūnų organizmui kovoti su virusu ir jų skaičių.
Tyrimo pagrindas yra natūrali reakcija į antigeną (piktybinis objektas kūno) - antikūnas (Baltymų sunaikina kenkėjai), kuri leidžia jums aptikti virusus įvairių buvimą, bakterijų.
IFA yra natūralus imuninis atsakas - antikūno sąveika su atitinkamu antigenu. Taip per IFA vamzdis su medžiaga yra papildomas pakaitomis antigenų arba antikūnai, po kurios jie yra aptikimas susidariusių antigeno-antikūno kompleksų.
Jei buvo suformuota atitikmenų, tada yra imuninės kompleksų toliau Fermentinės reakcijos metu įvyksta su dažanti medžiaga vieningos molekulės. Tai dėl to, kad spalvos pokyčio fermentinio nuoroda žinoma atsiranda po ligos tyrimas lygio apibrėžto ryšio nustatymo.
tipų imunoglobulinų
Žmogaus imunoglobulinai atskirti į keletą klasių, skirtingų savybių, struktūros ir antigeninėmis funkcijų sunkiųjų grandinių (H-grandinės). Visose žinduolių, įskaitant žmogaus, izoliuotų penkių H grandinės, kurios nustato imunoglobulinų, priklausančius atitinkamos klasės: G, M, A, D, E.
Kiekviena klasė yra atskirtos viena nuo kitos biologines savybes, ir savybė surišti antigenus, ir greitis ir sukibimo su molekulės.
Funkcijos kiekvieno imunoglobulino (LG) yra kitokios:
| Taškų kūno | funkcijos | Pusinės eliminacijos periodas (dienų) | vertė | |
| G | 70% | Suformuoti pasyvų imunitetą naujagimio; būtinas imuninis atsakas padidinti fagocitozę, |
21-24 | teikti aukštą humoralinį imunitetą infekcinių ligų |
| M | 5-10% | Mums reikia aktyvuoti fagocitozę, geba surišti antigenas 5 molekules |
5 | Ji suteikia pirminės imuninės reakcijos |
| 10-15 | Neutralizuoja toksinus ir virusus reikia ankstyvo imuniteto susidarymo Vietinės imuniteto formavimasis |
4-5 | gleivinės gynybos | |
| El | 0,2% | sukelti alergiją ir anafilaksiją aktyvuota audinių bazofilų | 2 | Apsauga nuo parazitų |
| D | 0,2% | dalyvauja limfocitų vystymosi, yra būtina, nes membraninį receptorius antigeno; | 3 | Jų vaidmuo yra mažai ištirtas |
Iš imunoglobulino atsiradimas įvyksta esant "grandinės» pobūdžio - LGM LGG, tokiu būdu organizmas reaguoja į kūno išvaizdą antigeno. laboratorijoje metu diagnozė vertina iš trijų pagrindinių imunoglobulino koncentracija - G, M, A.
Indikacijos pristatymo branduolinių medžiagų analizės imunoglobulinų
IFA analizė tampa vis labiau populiarus per metus.
Tokie tyrimai pagreitina diagnostikos pareiškimą, kuris yra labai svarbus patologijų, pavyzdžiui, gydyti:
- virusinė hepatito;
- ŽIV infekcija;
- citomegalo,
- Epstein-Barr virusas,
- Herpes virusas,
- tymai
- raudonukės,
- tuberkuliozė,
- salmoneliozė,
- dizenterija,
- erkinio encefalito,
- Helicobacter bakterijos,
- Laimo ligos,
- stabligės,
- sifilis,
- difterijos,
- leptospirozė,
- chlamidijos,
- ureaplasmosis,
- mikoplazmozė,
- kokliušo.
Tas pats tyrimas gali nustatyti infekcijos parazitų:
- plokščiosios kirmėlės
- Ascaris
- gistolicheskimi amebos,
- tremadami kepenų,
- Giardia,
- Toxoplasma,
- trichinelių,
- Fluke,
- cestodosis.
IFA yra unikalus žymeklis autoimuninių patologijų ir vėžio.
Pasirengimas gimdymui analizės
Rengiantis tyrime turi laikytis šių taisyklių:
- per dieną prieš kraujo ėmimą negali rūkyti ir gerti alkoholį,
- neužsiimti sporto ar kitų fizinės veiklos,
- bandyti išvengti streso
Prieš perduoti ELISA analizę, būtina vengti streso. - sustabdyti narkotikų vartojimą ne vėliau kaip likus 10 dienų prieš procedūrą.
Tie patys gydytojai rekomenduoja laikytis specialios dietos - neįtraukti riebalų ir kepto maisto, o jei tyrimai atliekami hepatitų, jums neturėtų valgyti jokių oranžinių daržovių, o ypač citrusų. Kraujo turėtų būti ryte ant tuščio skrandžio.
Klaidingai teigiami analizė yra dėl neapmokėtų rekomendacijas, ypač riebalų maisto, Ji veda prie pernelyg didelės koncentracijos trigliceridų kiekiui plazmoje, dėl, prie kurio laidumas ELISA mažėja.
Bandinių ėmimo procedūra
Visame kraujyje, serumo ar plazmos iš veninio kraujo gali būti naudojamas kaip bandomosios medžiagos. Tvora medžiaga, paprastai yra vykdomas iš kubitalinis veną yra naudojamas šiam tikslui vienkartinės adatos ir vakuumo vamzdis, 5-10 ml kraujo yra būtina.
Dėl tikslių rezultatų svarbu laikytis tinkamo technika Imant - iš laivo punkcijos ir aplinkinių audinių turi būti vienas manipuliacijos, todėl jis naudoja trumpą adatą su didesnio skersmens, todėl ji nėra sužeisti priešingą sieną į veną, o ne sugadintas eritrocitai.
Tiesiog išsaugoti raudonųjų kraujo ląstelių vientisumą, būtina, kad kraujas varva žemyn iš vamzdžių sienelių.
saugojimo metu, medžiaga turėtų būti vengiama, nes kuo jonizacijos Be to, medžiaga turėtų būti nesiliečia su likučių dezinfekcijos priemonės, todėl naudojama tik vienkartinė plastikinė buteliuko paženklinti paciento vardas, pavardė, data ir laikas pristatymo medžiagos.
Jeigu pageidaujama, trumpą saugojimą medžiagą, šaldymo kamera yra naudojamas su 2-4 temperatūroje apieC, jeigu reikia, ilgesnio sandėliavimo, medžiaga yra užšaldyti -20 apieS.
Kaip padaryti analizę
Po materialių gydytojas asistentas pajamų į būtinų manipuliacijų paruošimo. Šiam tikslui iš specialių rinkinių antigenų numeris Panirti nuosavybė išprovokuoti atsakymus kūno į dirgiklį yra infekcijos, hormonų, įvairius alergenus.
Schema "antigeno-antikūno" tikimasi reakcija atrodo taip:
- Pradinė reakcija - apibrėžta Ig (AB) ir išgrynintas patogenas antigeno (Ag).
- Detektavimui, atsirandančių imuninių kompleksų po naują imunologinį reakciją, kur susijusio antigeno konkretūs veiksmai Ig, ir antikūną jis išsikiša konyugat- Ig (AB).
- Paskutinis etapas - fermentinė reakcija, kartu su katalizatorius molekulė konjugatas. Substratas veikia kaip chromogeną (nedažytą), kuri reakcijos metu yra spalvos, ir spalvos intensyvumas yra nustatomas ir kiekybinė indeksas mėginyje imunoglobulinu.
Šiuo metu sukurta įvairių IFA variantai, nėra aiški klasifikacija iš jų. Paprastai, metodai yra laikomi jo atskyrimo hetero- ir homogeniškas pagrindu - visi analizės etapas vyksta naudojant kietą fazę arba naudojant tik tirpalas.
Šiuolaikiniai klinikiniai diagnostikos laboratorijos paprastai naudoja nevienalytė (kietosios fazės), ELISA, tai reiškia, kietas etapas absorbcijos antigenų ar antikūnų dėl kieto paviršiaus specialių skyles, esančių polistireno mikroplokštelės šulinėlyje yra padalintas į tiesioginės ir netiesioginės IFA.
Susijusi su tiesioginiu ELISA, antigenas įvesta pataisymai inkubavimo proceso tuščių šulinių metu paviršius tai testus mėginio medžiaga yra patalpintas į švarių šulinių 20-25 minučių, būtina pridėti prie jų antigeno paviršius. Po to norimo antikūno papildymas. Be to, medžiaga išlieka tam tikrą laiką, kad susidarytų obligacijas.
Antikūnai yra visada pridėta per daug, todėl net jei mėginyje nėra susiję antigenus ir antigenai, jei ne visi, nuorodos nebus. Norėdami pašalinti "ekstra" antikūnas, kurį atliko dekantuojant, paliekant tik tuos antikūnus, kurie nustatytų bendravimo su antigenu.
Tai po fermentinės reakcijos - to į šulinėlius su fermento tirpalo, po kurio dažymo įvyksta, gautų ryšius.
Naudojant nurodytų netiesioginis ELISA metodu, antikūnų iš anksto prijungtas prie fermentinės reakcijos substrato; šiuo atveju antikūnų sukabinimo prie antigeno įvyksta inkubavimo, kuris vyksta po to, kai per mobilizuoti jungtimis ant paviršiaus skyles ir užpildyti po konjuguota ir substratas-dažų chromogeniniu reagentu reakcija.
Tokiu būdu, pagrindinis skirtumas nuo tiesioginio fizinių netiesioginiu metodu yra ne medžiaga, sujungimo paviršiaus valyti šulinius, o jungiančioji prie antigeno imobilizuoto ant plokštelės.
Stabdo naudojant specializuotus įrenginius reakciją, kiekvieną šulinėlį yra veikiamas tolesnio proceso Fotometriją, po to lyginamosios analizės rezultato, gauto su anksčiau atliktos kontrolės mėginiai.
Jei aptikta padidėjimas optinio tankio bandinyje yra tada pripūstos ir specifinių antikūnų pagal bandymo rezultatas koncentracija.
Kai analizė yra pasirengusi
Tyrimas neatsižvelgiama daug laiko nuo kraujo surinkimo gauti rezultatas eina nuo 1 iki 10 dienų, priklausomai nuo diagnostikos priemonių.
Bandymo rezultatai ir jų interpretacija
Formoje, būdu gautų diagnozuoti pacientui rezultatas rodo, neigiamas arba teigiamas tam tikros klasės imunoglobulinai, kaip nurodyta kiekybiniam apribojimui įvairių klasių antikūnai.
Įvairūs rezultatų interpretavimas:
- IgM (+) (IgA, IgG nebuvo aptikta) - gijimą;
- IgM (-); IgG (+), IgA (+) - lėtinė infekcinė patologija;
- IgM, IgG, IgA (visi S - vertė) - jokių gynybos mechanizmus, infekcijos;
- IgG (+/-), IgA ir (+/-), IgM (+) - ūmus procesas;
- IgM (-), IgA (-), IgG (+) - poinfekcinio imunitetas;
- IgM, IgG, IgA (+) - lėtinė patologija ūmaus etapas.
Pavyzdžiui, jei nustatėme, buvo IgG ir IgM, pacientas gali turėti vieną iš šių ligų:
- virusinė hepatito;
- citomegalo;
- pūslelinė;
- vėjaraupiais;
- Chlamydia;
- stafilokokinė arba streptokokinis infekcija.
Fermentų imunologinė yra dažnai skiriami hormoniniai tyrimai, taisyklės yra nurodytos toliau esančioje lentelėje:
| Iš hormono pavadinimas | Paulius | norma | |
| 1 | tiroglobulinas | m / f, | Iki 70 IU / ml |
| 2 | tiroksinas | m / f, | 64-146 nmol / L |
| 3 | trijodtironino | m / f, | 1,8-2,8 nmol / l |
| 4 | nemokama tiroksinas | m / f, | 11-25 pmol / L |
| 5 | nemokama triyodritonin | m / f, | 4,49-9,3 pmol / L |
| 6 | Testosteronas, dihidrotestosterono | F | 0,5-10 mTV / L |
IFA analizė - tai diagnostinis testas, kuris įvertina vėžio tikimybę. Tačiau rezultatų aiškinimas atliekamas tik gydančio gydytojo.
Reikšmė testo rezultatai
IFA aptikti įvairių formų lytiškai plintančių infekcijų, įskaitant sifiliu, ir dažnai naudojamas nėščioms moterims atrankos.
Per šį tyrimą galite sužinoti infekcijos ir ligos stadijoje tyrimo metu:
- imunoglobulinai M pasakyti apie ligos trukmę;
- IgA - pacientas yra užsikrėtę daugiau nei prieš 30 dienų;
- IgG rasti "piko" liga, ar tuo metu, kai gydymas neseniai baigėsi.
Tyrimo šuliniai ant lėkštės su neigiamu indeksas yra bespalvis ir teigiamas nudažyti ryškiai geltonos spalvos. Jei teigiamų šulinių spalva skiriasi nuo kontrolės spalvos, rezultatas yra laikomi abejotinais, ir turi būti iš naujo mokytis.
Imunofermentinė testą - yra pirmas žingsnis ŽIV diagnozę. Analizė gali būti ne iš karto po to, kai tariamai infekcija turi laukti inkubacinio periodo (nuo 14 dienų iki 6 mėnesių) pabaigą.
Per antikūnų prieš ŽIV-1 ir ŽIV-2 analizės, yra paieška AT G klasės, kuris paprastai pasirodo vėliau etape ir A ir M klasės, gali būti apibrėžta ankstyvosiose stadijose (inkubacijos metu laikotarpis).
po gavus teigiamus pavyzdžius:
- Jei pirmasis bandymas buvo teigiamas, kraujas vėl tikrinamas kito laboratorinio asistentas;
- antras teigiamas rezultatas rodo RESIT medžiaga
- pasikartojimai rezultatas, pacientas yra priskirtas imunopernašos.
Galutinė išvada apie ŽIV infekcijos buvimą, turi būti išduodamas tik po to, kai munoblotingu rezultatas.
IFA taip pat naudojamas kaip diagnostinio tyrimo tuberkuliozės, tačiau, jei pacientas net turėjo antikūnų prieš šią ligą, tai nėra visada patvirtina jo tuberkuliozės buvimą, todėl PAV yra dažnai naudojamas kaip nurodyti tokie patys diagnozuoti latentinis ekstrapulmonine metodą forma.
IFA analizė - tai tyrimas, kuris leidžia aptikti pacientą užkrėstas parazitais ir pirmuonis, atsižvelgiant į diagnozę, žinoma, gali būti nustatytas net infekcijos laiką.
| Chlamydia | citomegalo | parazitai |
| IgM Aptinka 7 dienas po infekcijos, | IgM aptikti 30-45 dienų po užsikrėtimo arba atgaivinimo infekcijos 4-6 mėnesius per | Tyrimas nustatė IgME. IgG- lėtinis infekcijos stadija |
| IgA - infekcija pasireiškė daugiau nei prieš 30 dienų | ||
| IgG - invazija yra ūminės fazės metu | ||
| IgG - patvirtina diagnozę ir rodo veiksmingumas |
Argumentai "už" ir "prieš" analize
IFA turi daug privalumų, kuris paaiškina savo populiarumą tarp gydytojų ir pacientų, tai yra:
- didelio tikslumo rezultato,
- prieinama kaina,
- greitų rezultatų,
- atskleisti ligos stadija,
- kontrolė ligos dinamiką.
Tačiau, egzistuoja par su privalumus ir trūkumas - retais atvejais analizė klaidingi teigiami arba klaidingi neigiami.
Kodėl rezultatas gali būti klaidinanti
gali atsirasti dėl to, dėl techninių pažeidimų Klaidos, tas pats tyrimas yra nepatikimas žmonių su kai lėtinių ligų (reumatoidinis faktorius), kurių būdingos yra specifinis plėtros antikūnai.
Taip pat galutinio rezultato įtakoja pacientų vaistų ir medžiagų apykaitos sutrikimų naudojimui. Dėl šių priežasčių, teigiamas rezultatas ŽIV ir vėžio patologijos reikalauja naujo paleidimo bandymus.
Tyrimo kaina
IFA Kaina skiriasi priklausomai nuo diagnostikos srityse (RUB.):
- hepatito 250 -900;
- Virusai - 250 -1000;
- ŽIV - 250-350;
- kirminas užkrėtimo - 280 - 900;
- Sifilio -150-250;
- grybelinės infekcijos 400-500.
Imunofermentinė Analizės Kraujo yra viena iš efektyviausių metodų tyrimus daugelio virusinių patologijų, parazitinių infekcijų, onkologinių patologijų. Tokie tyrimai kaip IFA daugiausia palengvina diagnostikos pareiškimą, tačiau ši analizė neturėtų būti aiškinama nepriklausomai pacientas turi būti užsiima iššifravimą gydytoją.
Autorius straipsnis: bacio
Registracija straipsnio: Łoziński Olegas
Vaizdo ELISA bandyme
Kaip yra ELISA analizė: