Daugeliu atvejų, pacientai susiduria su tokia situacija, kai tyrimas arba nustatyti reikia PGR ligos diagnozę. Svarbu suprasti, kas tai yra ir tai, ko reikia.
Polimerazės grandininė reakcija (PGR) - tai yra tyrimas, kuris padeda nustatyti daugybę ligų pradžioje vystymosi etapus. Jo esmė yra rasti DNR arba RNR dabartį organizme patogeno. PGR nustatyti sukėlėjas tais atvejais, kai kitų rūšių tyrimai neveiksmingas.
Šiame straipsnyje:
- 1 Kodėl PGR diagnozė yra toks populiarus?
- 2 Iš PGR analizės esmė
- 3 Privalumai ir trūkumai metodu
- 4 Kokiose srityse metodo
- 5 Kuris infekcijos diagnozę PGR
- 6 Kas yra biologiniai medžiagos tirtos
- 7 Kaip pasiruošti tyrimui
- 8 PGR analizės etapai
- 9 PGR nėštumo metu
- 10 PGR, ŽIV infekcijos diagnostikos
- 11 PGR už hepatito diagnozę
- 12 Bandinys tuberkuliozės
- 13 PGR diagnozuoti ŽPV
- 14 dedervinė
- 15 Integruota PGR atrankos
- 16 Transkripcijos PGR analizė
- 17 Iš PGR diagnostikos tikslumas
- 18 Nes tai, ką gali gauti klaidingą rezultatą?
- 19 Kur eiti PGR diagnostika
- 20 PGR analizė: laiko ir sąnaudų
- 21 Vaizdo įrašai apie PGR diagnostika
Kodėl PGR diagnozė yra toks populiarus?
Šio metodo populiarumas slypi jos paprastumo ir plotis naudojimui. Jis naudojamas gydytojams diagnozuoti įvairias ligas. Tai leidžia greitai atlikti sudėtingą kiekybinę ir genomo tyrimus.
Vienas iš svarbiausių medicinos reikmėms klasikinis PGR metodas yra mikroorganizmų aptikimo, kuris gali sukelti patologinių sąlygų.
Iš PGR analizės esmė
PGR diagnostika (paaiškinta molekulinės biologijos) yra molekulinio klonavimo metodas naudojamas analizė trumpą DNR sekos, kuris yra šio minimaliais kiekiais mėginiuose, kurių sudėtyje yra genetinis medžiagos. Šis metodas dažnai vadinamas kaip "kopijavimo DNR."
PGR diagnostika atlikti in vitro (kūno išorėje) laboratorijoje, ir atsižvelgiant į natūralią proceso dvigubai DNR prieš savo padalinį. Be to, kad galėtų aptikti viruso, bakterijų ar kitų mikroorganizmų mėginyje, PGR leidžia jų kiekio nustatymą.
Ligų, tokių kaip infekcijos su hepatito C virusu arba žmogaus imunodeficito virusu (ŽIV), viruso apkrova yra geras rodiklis, kokiame etape liga yra ir kaip efektyviai yra terapija.
Ginkluotosios su šios informacijos, gydytojai gali nustatyti, kada pradėti gydymą ir stebėti procesą. Tai leidžia jums padaryti individualų požiūrį į kiekvieną pacientą.
PGR diagnozė apima tris etapus, į kiekvieną iš kurių tikslinių DNR didėja skaičius žymiai. Kaip tokios reakcijos rezultatas yra gaunamas daugiau kaip vienas milijardas kopijas originalas arba "Target" DNR, kuri leidžia įvertinti viruso buvimą organizme. Tai yra pagrindinis bruožas PGR metodu.
Privalumai ir trūkumai metodu
PGR diagnostika (kas tai yra aprašyta aukščiau) buvo aprašyta išsamiai Kerry Mullis 1983. Nuo metodas yra labai populiarus laboratorijoje.
Pagrindiniai privalumai šio tyrimo tipas yra:
- universalumas;
- apie rezultatus greitis;
- didelė tikimybė, gauti patikimus rezultatus;
- specifiškumas;
- įvairovė ligų, kurios gali būti nustatyta.
PGR metodu universalumas yra gebėjimas naudoti bet kokį žmogaus fiziologinį medžiagą. Net vienas plaukas pakankamai analizė.
Duomenų apdorojimo procesas, per automatizavimo, tai gali užtrukti keletą valandų. Specifiškumas yra skirti tam tikro DNR fragmentą, kuris yra būdingas tam tikros patogeno. Naudojant PGR analizė daugelio ligų galima diagnozuoti kaip didinamas, o latentinis etapas srauto.
Tačiau, nepaisant to, kad labai daug privalumų, PGR diagnostikos metodas turi keletą trūkumų:
- klaidingų teigiamų rezultatų tikimybė;
- didelio jautrumo;
- nepastovumas mikroorganizmų.
Pagrindinis trūkumas metodo yra nesugebėjimas atskirti PGR gyvenančių mikroorganizmų iš mirusiųjų. Paprastai tai reiškia, kad tokioje situacijoje, kai jums reikia įvertinti gydymo sėkmę. Tokiu atveju, jei liga yra gydoma, negyvas ląsteles vis dar yra kai žmogaus organizme laikas, o jo pilnas atnaujinimas reikalauja šiek tiek laiko nuo 4 iki 6 savaičių.
Didelio jautrumo yra privalumas, o tuo pačiu metu trūkumu. Kai kurie mikroorganizmų yra nedideliais kiekiais organizme. Todėl, šiuo atveju, tai diagnostikos metodas nėra informatyvus, ir patarė naudoti kitų tipų tyrimams.
Bet mikroorganizmai gali mutuoti. Ir net nepaisant to, kad konkretus fragmentas naudotu amplifikacijos procesą, kuris Jau gali keistis, jis vis dar gali įsigyti mutacijas ir tapti nematoma bandymo sistemos. Ši situacija yra paaiškinama tuo, kad laboratorinių tyrimų sistemos įvairovė gali parodyti visiškai skirtingus rezultatus.
Kokiose srityse metodo
PGR tyrimas gali būti naudojamas klinikinėje praktikoje dėl įvairių ligų nustatymo. Plačiai naudojamas ginekologijoje, urologija, gastroenterologijos, onkologija, ir tt.. Be to, jis efektyviai naudojamas ekspertizės nustatyti ir nustatyti tėvystę.
Šis tyrimo tipas yra naudojamas planavimo etape ir nėštumo metu. Analizė TORCH-infekcijos atliekamas siekiant nustatyti infekcijos buvimą moterims. Ligos, kurias sukelia viename iš infekcijų gali būti lengvos formos moteriai, bet gali sukelti sunkių apsigimimų vaisiui, iki pat savo mirties.
Taip pat diagnostikos PGR metodas padeda nustatyti genetinį polinkį plėtoti tam tikras ligas ateityje.
Kuris infekcijos diagnozę PGR
PGR padeda nustatyti virusų, bakterijų ir grybelių.
Dažniausiai ligos, kuri gali būti diagnozuota su juo:
- infekcinės neurologinių ligų (meningitas, mielito);
- piktybinių navikų (leukemija, limfoma);
- virusinių ligų (ŽIV, žmogaus papilomos viruso, citomegaloviruso, enterovirusas, hepatito viruso, raudonukės, adenovirusų ir kt.);
- bakterinės infekcijos;
- lytiniu keliu plintančių infekcija (ureplazmoz, chlamidijos, Trichomonozė);
- ligų, kurias sukelia grybeliai (kandidamikozė, mikoplazmozė);
- pūslelinė;
- Oh liga;
- tuberkuliozė, plaučių uždegimas, difterijos, tiek virusinės ir bakterinės kilmės;
- skrandžio opos, H. pylori infekcija, kurią sukeltų kitų.
Kas yra biologiniai medžiagos tirtos
Atsižvelgiant į ligą, simptomai ir objektyvaus tyrimo PGR diagnostika gali naudoti bet kurios skystos arba fiziologinį pobūdį iš audinio gabalas.
Tai gali būti:
- kraujo;
- seilių;
- skrepliai;
- šlapimo;
- išmatose;
- burnos ertmės ir ryklės tamponu;
- gabalas pažeistą audinį;
- sinovinio skysčio;
- grandymo iš moterų makšties arba vyrams šlaplės;
- ejakuliato;
- Plaukų ir kt.
Be ligų Urogenitalinę sistemą veikiantys paimtas šlapimo tamponu iš moterų makšties arba vyrams šlaplę. Veninio kraujo išnuomotas diagnozuoti ligų, tokių kaip ŽIV, hepatito tipo, TORCH-infekcijos.
Siekiant paneigti arba patvirtinti onkologija, operacijos metu pašalinami vienetų audinių biopsija.
Kaip pasiruošti tyrimui
Ypač preparatai Tyrimo priklauso nuo Biomaterial, kuri suteikia iki. Taip pat reikėtų žinoti, kad jums reikia pašalinti priėmimą antibiotikais ir kitais vaistais. Stebėti gydymo veiksmingumą turėtų atlaikyti intervalą gavus narkotikų mažiausiai 4 savaites.
Kraujo nuoma ryte ant tuščio skrandžio. Šlapimo ir išmatų turėtų būti patalpintas į skirtas šis, visiškai sterilų konteinerį. Taigi, prieš renkant šlapimą būtina atlikti higienos išorinių lyties organų gleivinei.
Jei išsinuomoti tepinėlį, turite:
- ne šlapintis 3 valandas;
- nerekomenduojama plauti ir douche dieną prieš (moterims);
- per dieną sustabdyti lytinį gyvenimą;
- Pap moterys turėtų imtis ciklo viduryje.
PGR analizės etapai
Prieš PGR pradžios, DNR turi būti išskirtas iš mėginio. Izoliavimas DNR yra multi-žingsnis procesas, kuris gali būti atliktas rankiniu būdu arba instrumentiškai.
Po to, kai prasideda mėginio paruošimo PGRI procesą:
- atskyrimas taikinio DNR (denatūracijos);
- amplifikacijos (dauginimas) DNR fragmentų;
- aptikimo (identifikavimo) iš amplifikuotos DNR fragmentų.
Pirmojo etapo PGR yra vadinamas denatūracijos. Jo esmė yra tai, kad vamzdis su DNR pavyzdžio yra kaitinamas iki aukštos temperatūros (maždaug 90 laipsnių). Nes iš aukštai temperatūrai sunaikinti silpnas ryšius tarp nukleotidų, sudarančiomis molekulių kodą. Rezultatas yra dvigrandę DNR arba RNR atskyrimas į dvi atskiras skaidulas.
Dėl "grynumo" Biomaterial tyrime atitenka specialų sprendimą, kuris ištirpsta organinių medžiagų. Šio etapo trukmė priklauso nuo medžiagos ir patogeno rūšies.
PGR diagnostika (kas ji yra aprašyta aukščiau) ir antroje stadijoje atlieka DNR fragmentų dauginimąsi, daugumos DNR infekcijos pagrindu. PGR nekopijuoja visą nukleino rūgšties mėginio. IT kopijos tik konkrečią seką genetinio kodo, trumpas fragmentas (gruntas).
Antrajame etape vamzdis yra atšaldomas. Visas procesas yra automatizuotas PGR įrenginys, vadinamas Jutiklis ciklų arba termostatas, ir gali būti užbaigtas per keletą valandų. PGR įrenginys yra užprogramuotas pakeisti reakcijos mišinio kas keletą minučių temperatūrą. Tai atsitinka, kad prie trumpų fragmentų gali liestis su Viengrandės šabloną.
Amplifikacijos įvyksta per 30-40 ciklų. Per šį laikotarpį, gydytojo asistentas kopijos DNR fragmento ir padidina grandininė reakcija metodą, skaičių. Taigi, kiekvieno ciklo kopijų skaičius padidėja iki kelių milijonų ar net milijardų.
Įvedama trečios fazės tyrimo ten yra iš virusų ir bakterijų DNR buvimą identifikavimo. Tai pasiekiama dėl susidariusio mišinio paskirstymo ir pridedant prie jo specialų sprendimą. Šis skystis leidžia DNR fragmentai įsigyti tam tikrą spalvą pagal ultravioletinių spindulių veiksmų. Tai rodo, kad patogeninių bakterijų yra žmogaus organizme.
PGR nėštumo metu
PGR diagnostika (kas tai yra aprašyta pirmiau) gali būti vartojamas pirmą kartą nėštumo metu, nes yra privalomas. Šis metodas padeda nustatyti paslėptą infekcija ir apsigimimų pavojų vaisiui.
Analizei, naudojant:
- makšties tamponas;
- veninio kraujo;
- šlapimo;
- amniono ir placentos audinių;
- stuburo ar sąnarių skystis.
Ten infekcinės ligos pobūdį,, kuris gali neigiamai paveikti vaisiaus vystymąsi, sukelia defektus, sukelti priešlaikinio gimdymo ir persileidimus. Jie yra ypač pavojingas pirmąjį nėštumo trimestrą ir, daugeliu atvejų, yra medicininė indikacija abortą. Šios infekcijos turi bendrą pavadinimą Torch kompleksą.
PGR analizė padeda nustatyti buvimą ar nebuvimą infekcijos nėščioms moterims. Dažnai atliekami planavimo nėštumo stadijoje arba pirmą trimestrą. Be teigiamo rezultato atveju, ji užima pakartoti tyrimą. Tai buvo tik po rezultatų patvirtinimo po gydymo.
PGR, ŽIV infekcijos diagnostikos
PGR diagnozavimo būdas, ŽIV infekcijos gydymui, yra brangus analizė ir naudojamas tam tikroms indikacijoms. Tai apima donorystę, taip pat jis gali būti skiriamas pacientams, kurie patyrė automobilio avariją su žmonėmis, ŽIV vežėjams.
PGR padeda nustatyti infekciją į ankstyvosiose stadijose prieš kūnas sukūrė antikūnų ŽIV. Rezultatas yra didelis procentas tikimybės tyrimo gali parodyti per 5-14 dienų nuo viruso įsiskverbimo.
Kitais atvejais, iš į žmogaus kūną viruso buvimas padeda nustatyti imunnofermentny analizės (IFA). Jis apibrėžia ŽIV antikūnų, žmogaus kraujo, kuris prasideda gaminti 1-3 mėnesių po užsikrėtimo. Kiekybinis nustatymas mikroorganizmų analizę būtina stebėti pacientų gydymas.
PGR už hepatito diagnozę
Hepatito C viruso yra sunki liga, kuri gali sukelti vystymosi cirozė. Inkubacinis laikotarpis, kuris gali būti iki 12 mėnesių, virusas negali pasireikšti, pacientas yra praktiškai nėra užkrečiama, ir virusas negali būti identifikuojamas pagal įprastas kraujo tyrimus.
Dažniausiai, kai ne laiku gydyti, liga tampa lėtinė ir gresia kelių komplikacijų.
Po užsikrėtimo hepatito B, inkubacinis laikotarpis yra ilgas, ir ne pirmas simptomai gali būti pastebėta tik po 4 savaičių. Ji buvo per šį laikotarpį IFA gali parodyti viruso buvimą organizme.
PGR leidžia jums:
- nustatyti ligą inkubacijos vystymosi stadijoje;
- leidžia abejotinas analizes kiti tyrimai;
- įvertinti antivirusinių terapijos efektyvumą.
Nebuvimas DNR-HBV atlikti pasibaigus gydymo - nuo jos veiksmingumą ženklas.
Bandinys tuberkuliozės
Plėtros provokuoja tuberkuliozė gumbelis Bacillus, kurie gali patekti į žmogaus kūną ore lašelių. Liga turi dvi formas: paslėptas ir aiški. Pirmuoju atveju, užkrėstas asmuo nėra infekcijos ir mikobakterijų skrepliuose negali aptikti net PGR vežėjas. Šios formos pavojus vis dar turi, kaip gali būti perkeliami į atvirą etape.
Atviras (aktyvus) žingsnis yra pavojus kitiems, net griežtai laikantis taisyklių asmens higienos atveju. Siekiant nustatyti ligos diagnozavimo naudojant fluorografinį, ir rentgeno tomografija krūtinės ląstos. Taip pat naudojamas šiam tikslui tuberkulirovannuyu odos mėginio (Mantoux mėginys). Tačiau efektyviausias būdas tyrimų yra PGR.
Naudojama kaip mėginių:
- kraujo;
- skrepliai;
- bronchų skystis.
PGR diagnozuoti ŽPV
Diagnozė ŽPV atliekama atveju simptomų, tokių kaip papilomų ir karpų lytinių organų srityje. Tyrimas taip pat skiriamas į planavimo nėštumo stadijoje nevaisingumo, persileidimų atveju, ir taip pat infekcijos vieno iš partnerių, taip pat vieną iš perdavimo mechanizmų situacijos - seksualinės.
Pavojingiausia nėra labai buvimas organizme viruso, ir jos tipą. Kai kurie iš jų (16 ir 18) tipų Aukštos rizikos ir gali sukelti gimdos kaklelio vėžį moterims. PGR metodas gali būti vartojamas kartu su kitų rūšių tyrimams. Analizuoti dažniausiai naudojamas tamponu iš lytinių organų. Kraujo, šlapimo ir makšties kaip Biomaterial naudojamas labai retai.
dedervinė
Šis bandymas diagnozės lytinių organų infekcijos herpes simplex 1 tipo viruso ir 2 (HSV 1 / HSV2). Su teigiamo rezultato, HSV2, turėtų būti tiriami dėl ŽIV ir kitų lytiniu keliu plintančių ligų. Analizei reikia veninio kraujo pacientui. taip pat gali būti tiriami šlapimo, izoliaciją ir turinį išbėrimas, kai simptomus.
Integruota PGR atrankos
Į skaitymo arba sudėtingų PGR atveju gali būti priskirtas, siekiant užkirsti kelią ligų. Dažniausiai iniciatorius aptarnauja pacientą, yra atvejų, kai išsamus tyrimas yra skirtas protrūkius tam tikrų ligų prevencijos tam tikrame regione.
PGR-12 - tai išsamus tyrimas, kuris apima šias infekcijas:
- Hepatito.
- ŽIV.
- Pūslelinė.
- LPL.
- Tuberkuliozė.
- Encefalitas.
- Kandidamikozė.
- Helicobacter infekcija.
- Citomegalo.
- Mononukleozė.
- Oncoviruses.
- Listeriozė.
Transkripcijos PGR analizė
Po to, kai analizės PGR teigiamai arba neigiamai rezultatas gali būti skambėjo.
Be teigiamo rezultato atveju, rekomenduojame pakartotinai paleidimą bandymus ir kiekybine PGR tyrimą. Tai padeda nustatyti infekcijos koncentracija organizme dėl tinkamo gydymo paskyrimo.
Iš PGR diagnostikos tikslumas
Daugeliu atvejų, PGR diagnostika suteikia labai tikslius rezultatus. Tačiau kai kuriais atvejais, siekiant patvirtinti diagnozę teisingumas reikalauja papildomų tyrimų metodus.
Nes tai, ką gali gauti klaidingą rezultatą?
Klaidingai teigiami rezultatai gali būti gauti kaip netinkamą rinkimo ir analizės daugeliu mokslinių tyrimų procedūrų rezultatas.
Pacientas gali būti klaidinga informacija turinio netinkamo rengiantis Biomaterial pristatymo atveju kaltininkas. Įrengtos laboratorijos ir profesionalus gydytojas gali tiesiogiai paveikti tyrimo rezultatus.
Kur eiti PGR diagnostika
PGR diagnostika atliekama privačiose klinikose ir laboratorijose gydytojo paskyrimo arba prašymo dėl nusikalstamų veikų prevencijos paciento iniciatyva. Pirmenybė turėtų būti teikiama klinikose ir laboratorijose su šiuolaikine įranga, kad yra ne pirmus metus medicinos rinkoje ir pasiteisino.
PGR analizė: laiko ir sąnaudų
Tai diagnozė didelės vertės metodas yra skirtingi. Jo kaina svyruoja nuo 200 iki 500 rublių už kiekvieną rūšį. Išsami apžvalga su keliais infekcijos buvimą gali žymiai sutaupyti pinigų, palyginti su kiekvieno atskiro tyrimo apmokėjimo.
Tyrimo laikotarpis priklauso nuo infekcijos rūšies ir gali trukti nuo 1 iki 5 dienų. Be to, šie skaičiai priklauso nuo laboratorijos ir mokymo medicinos specialistų įrengimui.
PGR diagnostika (kad ji yra išsamiai aprašyta šiame straipsnyje) yra pats tiksliausias ir greitai metodas tyrime. Jis yra vienas iš svarbiausių atradimų XX amžiuje. medicinos srityje.
Naudojant šį metodą tapo įmanoma išgydyti daug ligų. Tačiau nereikia pamiršti, kad PGR turi keletą trūkumų, o jo veiksmingumas kartais pakyla kartu su kitais metodais.
Registracija straipsnio: Vladimiras Didysis
Vaizdo įrašai apie PGR diagnostika
Apie PGR tikslumo: