Wassermanova reakce (RW). Co je to za analýzu, jak ji přijmout, kolik se toho udělá včas?

V roce 1906 g. imunolog a mikrobiolog německého původu A. NS. von Wassermann ve spolupráci s A. L. S. Neisser vyvinul test pro diagnostika syfilis. Toto je reakce, která detekuje přítomnost protilátek proti původci onemocnění. V současné době je klasický výzkumný přístup málo používaný, ale všechny metody zaměřené na identifikaci onemocnění jsou pojmenovány po jeho tvůrci.

Podstata analýzy

Syfilis je sexuálně přenosná nemoc infekční povahy. Je způsoben bledým treponémem a je charakterizován periodickým průběhem, poškozením sliznic, kůže, pohybového aparátu a vnitřních orgánů.

Má následující přenosové cesty:

• Sexuální: je nejčastější.
insta story viewer
• Kontaktní domácnost: děti rodičů se syfilisem se nakazí tímto způsobem.
• Transfúze: po transfuzi krve a jejích složek od dárce s původcem v těle.
• Transplacentární: přenášeno na plod placentou od matky během těhotenství.
• Profesionál: zdravotnický personál se nakazí při manipulaci s osobami infikovanými bledým treponémem: chirurgové, porodníci-gynekologové, zubaři.

Původce onemocnění zůstává aktivní v čerstvých sekretech infikované osoby, jako jsou: sliny, moč a další fyziologické tekutiny.

Syfilis je ve své formě rozdělen na:

• Hlavní. Vyskytuje se po infekci bledým treponémem. Inkubační doba je 6–8 týdnů od okamžiku infekce. Je charakterizována ulcerativní tvorbou v místě zavedení patogenu, zvýšením submandibulárních nebo tříselných lymfatických uzlin. Pozitivní reakce je diagnostikována v 8 z 10 případů.
• Sekundární. Charakterizována bledou vyrážkou po celém těle, včetně palmárního a plantárního povrchu, příznaky intoxikace, charakteristické pro respirační infekci. Je detekován téměř ve 100% případů.
• Terciární. U 1/3 pacientů dává RW test negativní výsledek. U nemocného člověka je ovlivněna kostní kostra, což způsobuje její deformaci, vnitřní orgány a nervový systém.
• Nosné bakterie. Člověk se nakazí bledým treponémem, silná imunitní reakce těla potlačuje jeho aktivní reprodukci, ale nedokáže infekci zcela zničit. V tomto případě neexistují žádné příznaky onemocnění, ale nosič je nebezpečný pro lidi, se kterými přichází do styku.

Wassermanova reakce je sérologická studie, která se provádí expresní metodou. Jeho jiný název: krevní test pro RW. Studium materiálu pro syfilis je založeno na identifikaci specifických protilátek, které jsou produkovány imunitní systém lidského těla v reakci na invazi cizích antigenů do krevního oběhu, což je způsobuje smrt.

Původce onemocnění obsahuje nespecifický protein zvaný kardiolipin. Lékařský průmysl jej získává ze srdcí skotu a vydává ho hotový s pokyny. Při provádění studie se tato přidá do zkumavky obsahující biologický materiál (sérum). antigen, tvořící silné vazby mezi protilátkami a proteiny vrozené imunity (komplementu) krve pacient. Poté je kompozice podrobena hemolýze, po které jsou vyhodnoceny výsledky.

Analýza RW indikuje a fixuje autoimunitní proces, který byl v lidském těle spuštěn treponema pallidum.

Krev pro výzkum se odebírá pouze z žilní cévy v množství 5-10 ml. Manipulace se provádí v podmínkách ošetřovny polikliniky, diagnostického centra nebo nemocnice.

Co může ukázat?

Stanovení RW je založeno na odezvě vazby komplementu. Jeho účel: identifikovat protilátky proti původci onemocnění.

Testování syfilisu pomáhá:

• Stanovit diagnózu onemocnění v jeho první fázi.
• Určete dobu trvání infekce.
• Odhalte infekci v latentním (latentním) průběhu onemocnění.
• Sledujte léčbu.
• Prohlédněte si lidi, kteří jsou v kontaktu s nemocnou osobou, za nositele patogenu.

Indikace pro výzkum

Wassermanova reakce je krevní test, který se provádí za účelem diagnostiky a vyšetření následujících skupin lidí:

• Zdravotničtí pracovníci a zaměstnanci nemocnice.
• Lidé spojovaní s jídlem (pěstování, prodej, zpracování): práce v předškolních a školních zařízeních.
• Osoby, které jsou povoláním v kontaktu s kontaminovaným materiálem.
• Dárci fyziologických materiálů těla.
• Infikovaní HIV, drogově závislí a vedoucí k asociálnímu životnímu stylu.
• Pacienti podstupující léčbu v nemocnici, stejně jako ti, kterým je předepsána operace.
• S prodlouženou horečkou neznámého původu.
• Držitelé lázeňských poukazů.
• Těhotné ženy jsou vyšetřovány několikrát během celého období.
• Novorozené děti k identifikaci vrozeného syfilisu.
• Po styku s neformální známost bez použití ochranných prostředků (kondomů).
• Pokud máte podezření na infekci treponémem: vředy v oblasti genitálií, zvětšené lymfatické uzliny, kožní vyrážky.
• Při každoroční lékařské prohlídce.
• U pacientů podstupujících léčbu syfilisu sledovat dynamiku onemocnění a účinnost léčby pro její včasnou korekci.

Během období porodu dítěte

Těhotným ženám je předepsán krevní test na RW 3krát:

1. Při první žádosti o těhotenství a registraci.
2. Ve 13 týdnech těhotenství.
3. Po přijetí do nemocnice.

Žena, která má syfilis, by se měla zdržet početí dítěte po dobu 5 let. Měli byste vědět, že Wassermanova reakce při nošení plodu u 1,5 ze 100 těhotných žen je falešně pozitivní. Lékař proto předepisuje druhou analýzu. Po potvrzení infekce treponémou pacient potřebuje léčbu, aby chránil plod před infekcí a zabránil nitroděložní smrti.

Kolik dní trvá analýza?

Wassermanova reakce je metoda související s expresní diagnostikou k identifikaci původce syfilis. Studie klasickým způsobem probíhá během dne, po kterém lékař obdrží analytická data. Výjimkou jsou okresní polikliniky. Vzhledem k jejich odlehlosti od laboratoří dermatovenózního dispenzáře bude analýza muset počkat až 2 týdny (je to způsobeno transportem materiálu a dodáním výsledků ve stanovené dny).

V dnešní době je široce využívána metoda PCR (polymerázová řetězová reakce). Je to přesná studie k identifikaci původce onemocnění. Jeho spolehlivost dosahuje téměř 100%. Výsledek je znám po 5 hodinách. po odebrání biologického materiálu. Nevýhoda: vysoká cena. Soukromým klinikám je proto k dispozici analýza.

Jak dlouho je analýza platná?

Trvání spolehlivosti výsledků pro reakci RW nepřesáhne 3 měsíce. Analýza se nejčastěji provádí během preventivní lékařské prohlídky jednou ročně. Je třeba poznamenat, že během inkubační doby nelze patogen detekovat, protože krev obsahuje velmi malé množství protilátek. Pozitivní test je možný 4 týdny po penetraci bledého treponému do lidského těla.

Příprava na analýzu

Wassermanova reakce je jednou z laboratorních výzkumných metod a vyžaduje splnění nezbytných podmínek při přípravě na sběr biomateriálu. To je nezbytné k odstranění chyb, které ovlivňují výsledek.

Před testováním krve na RW je třeba zvážit následující faktory:

• Krev se odebírá v první polovině dne přísně na prázdný žaludek nebo abstinence od jídla by měla být do 6 hodin, protože spolehlivost je ovlivněna enzymy trávicího systému.
• Den před vyšetřením nesmíte konzumovat: kávu a kofeinové nápoje, ovocné šťávy, tučná jídla, alkohol. Bezprostředně před odběrem krve se musíte zdržet tabáku.
• Nedoporučuje se užívat léky po dobu 24 hodin, zejména ty, které obsahují digitalis, a antibiotika. Lékař by měl být upozorněn na životně důležité léky, aby s tím mohl počítat při dekódování výsledku.
• V předvečer provádění analýzy se člověk musí zdržet fyzického, emočního stresu.
• Můžete pít vodu bez plynu nebo vařenou.

Jak se postup provádí

Ke kontrole osoby na přítomnost patogenu bledého treponému v jeho těle je zapotřebí krev odebraná z žíly.

Sekvenování:

1. Během odběru materiálu musí pacient ležet nebo sedět.
2. Přes paži je nad loktem natažený lékařský škrtidlo.
3. Místo budoucí punkce je ošetřeno ubrouskem namočeným v 70% alkoholu.
4. Do žilní cévy se vloží jehla a připojí se k vakuové trubici. Pomocí vakua se odebere 5-10 ml krve.
5. Po injekci je rána stlačena materiálem obsahujícím alkohol. Aby se zabránilo krvácení, paže je na několik minut ohnutá v lokti nebo sestra aplikuje těsný fixační obvaz.
6. Při analýze u dětí mladších jednoho roku se používají žíly na hlavě dítěte.
7. Zkumavka s krevní masou je odeslána do laboratoře na testování protilátek proti patogenu. Skladování se provádí v chladničce po dobu nejvýše 48 hodin.

Technika výzkumu:

1. Sérum se od odebrané krve oddělí centrifugací.
2. Je rozdělen na 3 části, z nichž jedna je kontrolní a druhým 2 je injekčně podán kardiolipinový antigen. Poté se zkumavky umístí na 1 hodinu do termostatu s teplotou + 37 ° C, během kterého se v biologickém materiálu vytvoří silné vazby mezi protilátkami a injekčním léčivem.
3. Prostředek podléhá hemolýze pomocí chemikálií. Po 30-60 minutách. posoudit: negativní výsledek je prokázán destrukcí a hemolýzou erytrocytů. Absence nebo zpomalení reakce ve srovnání s kontrolním vzorkem naznačuje výskyt reakce navázání protilátek na antigen. Stádium onemocnění se hodnotí podle doby zpoždění.

   

Výsledky analýzy jsou odeslány lékaři, který předepsal vyšetření, nebo jsou rozdány pacientovi, když nezávisle jdou do lékařské laboratoře.

Pravděpodobnost chyby ve výsledcích

Chyba dosahuje 10-20% případů.

Je spojeno s:

• Přítomnost somatických onemocnění, která ovlivňují složení krve.
• Charakteristiky lidského těla.
• Přítomnost latentního průběhu syfilisu, který je kombinován s jinou patologií.
• Před odběrem vzorků pacient zanedbává doporučení.
• Nedostatečná kvalifikace laboratorních asistentů: chybné akce při odběru krve, jejím skladování a přepravě.
• Používání reagencií, jejichž platnost vypršela.
• Nerovnoměrná distribuce antigenu ve zkumavce, nepoužívání kontrolních vzorků krve při studiu materiálu.

Zkreslení výsledků mohou také ovlivnit nemoci infekční povahy: leptospiróza, recidivující horečka, borelióza způsobená kousnutím klíštěte, některými tropickými nemocemi Latinské Ameriky, Afriky (pinta, bejel). Jejich patogeny jsou v antigenech podobné treponema pallidum. Ve studii dávají falešně pozitivní reakci.

Dekódování

Wassermanova reakce je technika pro detekci bledého treponému v lidském těle, založená na reakci jeho imunitního systému na invazi proteinu podobného složení jako antigen původce syfilisu. Negativní výsledek (negativní) naznačuje nepřítomnost bakterií v krvi pacienta a je označen znaménkem „-“ (minus). Pozitivní se zapisuje znaménkem „+“ (plus).

Pozitivní Wassermanova reakce

Pozitivní RW naznačuje, že v lidském krevním séru byl nalezen kardiolipin, antigen treponema.

To je možné za následujících podmínek:

• Pacient je nemocný syfilisem.
• Test vyvolal falešně pozitivní reakci.
• S antifosfolipidovým syndromem.
• Do jednoho roku po léčbě syfilis.

V tomto případě je vždy přiřazeno opětovné vyšetření k detekci protilátek proti patogenu a dalším diagnostickým metodám.

V závislosti na době zpoždění reakce hemolýzy je výsledek testu interpretován následovně:

Množství „+“	Reakce	Hemolýza erytrocytů v čase	Počet patogenů
++++	Silně pozitivní	Nebyly tam žádné známky	Velmi velký
+++	Pozitivní	Značné zpoždění	Významný
++	Slabě pozitivní	Částečný	Malý
+	Pochybný	Bezvýznamný	Velmi málo nebo výsledek je špatný

Pacient je vyřazen z registru po třech po sobě jdoucích studiích na přítomnost patogenu, analýze mozkomíšního moku a vyšetření lékaři: oftalmologem, neurologem a otolaryngologem.

Wassermanova falešně pozitivní reakce

Falešně pozitivní RW může být spuštěno narušením endokrinního a imunitního systému, přítomností závažných somatických onemocnění.

Projevuje se následujícími infekcemi a stavy:

• Tuberkulóza bronchopulmonálního systému.
• Onemocnění pojivové tkáně.
• Infekční onemocnění: plané neštovice, mononukleóza, příušnice, spalničky.
• V období rekonvalescence a po očkování.
• Onkologie: lymfom, myelom.
• Hepatitida, cirhóza jater, infekce HIV.
• Cukrovka.
• Revmatická a autoimunitní onemocnění: systémový lupus erythematodes, malomocenství.
• Po nedávné mrtvici infarkt.
• V případě otravy a intoxikace.
• S brucelózou.
• U žen během menstruace, těhotenství, do 2 týdnů před a po porodu.
• U kojenců v prvních 10 dnech od narození.
• Po konzumaci tučných jídel, alkoholických nápojů, kouření.

Také chyba výsledku je ovlivněna pokročilým věkem pacienta (80+), četností transfuzí krevních složek při hemofilii, leukémii a injekčně podávanými léky.

V případě falešně pozitivního výsledku do „++“ je vyžadován druhý krevní test pacienta. Provádí se po několika týdnech nebo se používají jiné diagnostické metody založené na moderních laboratorních nástrojích.

Negativní Wassermanova reakce

Charakterizuje zdravého člověka (to platí pouze pro pohlavně přenosné choroby a neplatí pro somatická onemocnění), který nebyl nakažen syfilisem.

Je třeba poznamenat, že v prvních 3 týdnech po infekci bledým treponémem vykazuje Wassermanova reakce negativní výsledek. To je způsobeno malým množstvím protilátek v krvi pacienta. Po 1,5 měsíci je pozitivní test prokázán u 25% pacientů. Pouze ve výšce onemocnění se spolehlivost blíží 80–90%.

Falešně negativní RW je možné během období šedě negativního okna v jakékoli fázi onemocnění, stejně jako při odběru kapilární krve z prstu.

Jaké testy absolvují pacienti dodatečně?

Kritériem správné diagnózy syfilisu je izolace původce onemocnění nebo přítomnost protilátek proti němu.

Metody přímého výzkumu zahrnují:

• TMP - mikroskopie tmavého pole. Nejspolehlivější diagnostický přístup. Materiálem je výtok z vředu, eroze, obsah odebraný během punkce lymfatické uzliny. V tmavém poli pod mikroskopem se objeví bledý treponém ve formě spirály. Odlišnost od ostatních podobných patogenů je dána morfologií bakterie a jejími charakteristickými pohyby. Na základě toho je stanovena diagnóza.
• Podílový fond - přímá imunofluorescence. Používá se ke studiu výtoku z oblasti lézí ústní sliznice, konečníku, materiálu získaného při pitvě, biopsie. Technika analýzy spočívá v umístění vzorků na skleněné podložní sklíčko; během fluorescenční mikroskopie pozoruje laboratorní lékař záři jasně zeleného světla.
• PCR - polymerázová řetězová reakce. Technologie je založena na detekci DNA patogenu. Zdrojem je páteř, tkáň, plodová voda, semenná tekutina, krev.

Používají se také takové reakce a vyšetření jako:

• RIF - imunofluorescence.
• RPHA - pasivní hemaglutinace.
• RIBT - imobilizace bledých treponémů.
• ELISA - enzymový imunosorbentní test.
• Imunoblotting.

V XX století. Wassermanova reakce byla jediným způsobem, jak diagnostikovat a sledovat léčbu pacientů se syfilisem. Jedná se o levnou a rychlou analýzu s vysokým procentem přesnosti. V současné době byly vyvinuty nové výzkumné technologie, které dávají méně nespolehlivých výsledků. Některé laboratoře ale tuto technologii stále používají, protože je k dispozici.

Video o Wassermanově reakci

Krevní test RW: