Reazione di Wasserman (RW). Cos'è questa analisi, come prenderla, quanto è fatto in tempo

Nel 1906 G. immunologo e microbiologo di origine tedesca A. NS. von Wassermann in collaborazione con A. l. INSIEME A. Neisser ha sviluppato un test per diagnosi di sifilide. Questa è una reazione che rileva la presenza di anticorpi contro l'agente eziologico della malattia. Attualmente, l'approccio di ricerca classico è poco utilizzato, ma tutti i metodi volti a identificare la malattia prendono il nome dal suo creatore.

L'essenza dell'analisi

La sifilide è una malattia a trasmissione sessuale di natura infettiva. È causato da treponema pallido ed è caratterizzato da un decorso periodico, danni alle mucose, alla pelle, al sistema muscolo-scheletrico e agli organi interni.

Ha le seguenti vie di trasmissione:

• Sessuale: è il più comune.
• Contatto-famiglia: i bambini di genitori con la sifilide vengono infettati in questo modo.
• Trasfusione: dopo la trasfusione di sangue e dei suoi componenti da un donatore con un agente causale nel corpo.
• Transplacentare: trasmesso al feto attraverso la placenta dalla madre durante la gravidanza.
• Professionista: il personale medico si infetta quando esegue manipolazioni con persone infette da treponema pallido: chirurghi, ostetrici-ginecologi, dentisti.

L'agente eziologico della malattia rimane attivo nelle secrezioni fresche della persona infetta, come: saliva, urina e altri fluidi fisiologici.

Per la sua forma, la sifilide è divisa in:

• Primario. Si verifica dopo l'infezione da treponema pallido. Il periodo di incubazione è di 6-8 settimane dal momento dell'infezione. È caratterizzato da formazione ulcerosa nel sito di introduzione dell'agente patogeno, un aumento dei linfonodi sottomandibolari o inguinali. Una reazione positiva viene diagnosticata in 8 casi su 10.
• Secondario. Caratterizzato da una pallida eruzione cutanea su tutto il corpo, comprese le superfici palmare e plantare, sintomi di intossicazione, caratteristici di un'infezione respiratoria. Viene rilevato in quasi il 100% dei casi.
• Terziario. In 1/3 dei pazienti il ​​test RW dà esito negativo. In una persona malata, lo scheletro osseo è interessato, causandone la deformazione, gli organi interni e il sistema nervoso.
• Batteri portatori. Una persona viene infettata da treponema pallido, una forte risposta immunitaria del corpo sopprime la sua riproduzione attiva, ma non può distruggere completamente l'infezione. In questo caso, non ci sono sintomi della malattia, ma il portatore è pericoloso per le persone con cui entra in contatto.

La reazione di Wasserman è uno studio sierologico che viene effettuato con un metodo espresso. Il suo altro nome: analisi del sangue per RW. Lo studio del materiale per la sifilide si basa sull'identificazione di anticorpi specifici che vengono prodotti il sistema immunitario del corpo umano in risposta all'invasione di antigeni estranei nel flusso sanguigno, causandoli Morte.

L'agente eziologico della malattia contiene una proteina aspecifica chiamata cardiolipina. L'industria medica lo prende dal cuore del bestiame e lo rilascia già pronto, con le istruzioni. Quando si esegue uno studio, questo viene aggiunto a una provetta contenente un materiale biologico (siero). antigene, formando forti legami tra anticorpi e proteine ​​dell'immunità innata (complemento) del sangue il paziente. Quindi la composizione viene sottoposta a emolisi, dopo di che vengono valutati i risultati.

L'analisi per RW indica e risolve il processo autoimmune che è stato attivato nel corpo umano dal treponema pallidum.

Il sangue per la ricerca viene prelevato solo da un vaso venoso nella quantità di 5-10 ml. La manipolazione viene eseguita nelle condizioni della sala di trattamento del policlinico, del centro diagnostico o dell'ospedale.

Cosa può mostrare?

Il test RW si basa sulla risposta di legame del complemento. Il suo scopo: identificare gli anticorpi contro l'agente eziologico della malattia.

Il test della sifilide aiuta:

• Stabilire una diagnosi della malattia nella sua prima fase.
• Determina la durata dell'infezione.
• Rivela l'infezione nel decorso latente (latente) della malattia.
• Monitora il trattamento.
• Esaminare le persone che hanno contatti con una persona malata per il portatore dell'agente patogeno.

Indicazioni per la ricerca

La reazione di Wasserman è un esame del sangue che viene eseguito per la diagnosi e l'esame dei seguenti gruppi di persone:

• Professionisti medici e personale ospedaliero.
• Persone associate al cibo (coltivazione, vendita, lavorazione): lavoro in istituti prescolari e scolastici.
• Persone che, per professione, vengono a contatto con materiale contaminato.
• Donatori di materiali fisiologici del corpo.
• Infetto da HIV, tossicodipendente e conduce uno stile di vita asociale.
• Pazienti sottoposti a trattamento in un ospedale, così come quelli a cui è stata prescritta un'operazione.
• Con febbre prolungata di origine sconosciuta.
• Possessori di voucher termali.
• Le donne incinte vengono esaminate più volte durante l'intero periodo.
• I neonati per identificare la sifilide congenita.
• Dopo un rapporto con un conoscente occasionale senza l'uso di dispositivi di protezione (preservativo).
• Se sospetti un'infezione da treponema: ulcere nell'area genitale, linfonodi ingrossati, eruzioni cutanee.
• Quando si sottopone a una visita medica annuale.
• Per i pazienti sottoposti a trattamento per la sifilide, per monitorare la dinamica della malattia e l'efficacia del trattamento per la sua correzione tempestiva.

Durante il periodo di portare un bambino

Alle donne incinte viene prescritto un esame del sangue per RW 3 volte:

1. Quando fai domanda per la prima volta per la gravidanza e la registrazione.
2. A 13 settimane di gestazione.
3. Al momento del ricovero in ospedale.

Una donna che ha avuto la sifilide dovrebbe astenersi dal concepire un bambino per 5 anni. Dovresti sapere che la reazione di Wasserman durante il trasporto di un feto in 1,5 donne incinte su 100 è falsamente positiva. Pertanto, il medico prescrive una seconda analisi. Dopo la conferma dell'infezione da treponema, il paziente necessita di cure per proteggere il feto dall'infezione e prevenire la morte intrauterina.

Quanti giorni dura l'analisi?

La reazione di Wasserman è un metodo relativo alla diagnostica espressa per identificare l'agente eziologico della sifilide. Lo studio in modo classico viene effettuato durante il giorno, dopo di che il medico riceve i dati dell'analisi. L'eccezione sono i policlinici distrettuali. A causa della loro lontananza dai laboratori del dispensario dermatovenoso, l'analisi dovrà attendere fino a 2 settimane (ciò è dovuto al fatto che il materiale viene trasportato e i risultati vengono consegnati in giorni prestabiliti).

Al giorno d'oggi, il metodo PCR (reazione a catena della polimerasi) è ampiamente utilizzato. Si tratta di uno studio accurato per identificare l'agente eziologico della malattia. La sua affidabilità raggiunge quasi il 100%. Il risultato è noto dopo 5 ore. dopo aver prelevato materiale biologico. Svantaggio: prezzo elevato. Pertanto, l'analisi è disponibile per le cliniche private.

Per quanto tempo è valida l'analisi?

La durata dell'affidabilità dei risultati per la reazione RW non supera i 3 mesi. Molto spesso, l'analisi viene eseguita durante una visita medica preventiva una volta all'anno. Va notato che durante il periodo di incubazione, l'agente patogeno non può essere rilevato, poiché il sangue contiene una quantità molto piccola di anticorpi. Un test positivo è possibile 4 settimane dopo la penetrazione del treponema pallido nel corpo umano.

Preparazione per l'analisi

La reazione di Wasserman è uno dei metodi di ricerca di laboratorio e richiede il rispetto delle condizioni necessarie in preparazione alla raccolta del biomateriale. Ciò è necessario per eliminare gli errori che influiscono sul risultato.

Prima di analizzare il sangue per RW, è necessario considerare i seguenti fattori:

• Il sangue viene prelevato nella prima metà della giornata rigorosamente a stomaco vuoto o l'astinenza dal cibo dovrebbe essere entro 6 ore, poiché l'affidabilità è influenzata dagli enzimi dell'apparato digerente.
• Il giorno prima dell'esame non si devono consumare: caffè e bevande contenenti caffeina, succhi di frutta, cibi grassi, alcolici. Devi astenerti dal tabacco immediatamente prima di prendere il sangue.
• Non è consigliabile assumere farmaci per 24 ore, in particolare quelli contenenti digitale e antibiotici. Il medico dovrebbe essere informato sui farmaci vitali in modo che possa tenerne conto durante la decodifica del risultato.
• Alla vigilia di un'analisi, bisogna astenersi dallo stress fisico ed emotivo.
• Puoi bere acqua senza gas o bollita.

Come si svolge la procedura

Per controllare una persona per la presenza dell'agente patogeno del treponema pallido nel suo corpo, è necessario il sangue prelevato da una vena.

Sequenziamento:

1. Durante la raccolta del materiale, il paziente deve sdraiarsi o sedersi.
2. Un laccio emostatico medico viene tirato sul suo braccio sopra il gomito.
3. Il sito della futura puntura viene trattato con un tovagliolo imbevuto di alcol al 70%.
4. Un ago viene inserito nel vaso venoso e collegato a un tubo a vuoto. Con l'aiuto di un vuoto, vengono prelevati 5-10 ml di sangue.
5. Dopo l'iniezione, la ferita viene premuta con un materiale contenente alcol. Per prevenire l'emorragia, il braccio viene piegato all'altezza del gomito per alcuni minuti, oppure l'infermiera applica un bendaggio di fissaggio stretto.
6. Quando si esegue un'analisi nei bambini di età inferiore a un anno, vengono utilizzate le vene sulla testa del bambino.
7. Una provetta con una massa di sangue viene inviata al laboratorio per il test degli anticorpi contro l'agente patogeno. La conservazione viene effettuata in frigorifero per non più di 48 ore.

Tecnica di ricerca:

1. Il siero viene separato dal sangue prelevato mediante centrifugazione.
2. È diviso in 3 porzioni, una delle quali è il controllo e le altre 2 vengono iniettate con l'antigene cardiolipina. Quindi le provette vengono poste in un termostato con una temperatura di + 37 ° C per 1 ora, durante la quale si creano forti legami nel materiale biologico tra gli anticorpi e il farmaco iniettato.
3. La composizione subisce emolisi per mezzo di sostanze chimiche. Dopo 30-60 minuti. valutare: la distruzione e l'emolisi degli eritrociti testimonia un risultato negativo. L'assenza o il rallentamento della reazione rispetto al campione di controllo indica il verificarsi di una reazione di legame degli anticorpi all'antigene. Lo stadio della malattia è valutato dal tempo di ritardo.

   

I risultati dell'analisi vengono inviati al medico che ha prescritto l'esame o vengono consegnati al paziente quando si recano autonomamente al laboratorio medico.

Probabilità di errore nei risultati

L'errore raggiunge il 10-20% dei casi.

È collegato con:

• La presenza di malattie somatiche che influenzano la composizione del sangue.
• Le caratteristiche del corpo umano.
• La presenza di un corso latente di sifilide, che è combinato con un'altra patologia.
• Negligenza da parte del paziente delle raccomandazioni prima del campionamento.
• Qualifiche insufficienti dei tecnici di laboratorio: azioni errate durante il prelievo del sangue, la conservazione e il trasporto.
• Utilizzo di reagenti scaduti.
• Distribuzione irregolare dell'antigene in una provetta, mancato utilizzo di campioni di sangue di controllo nello studio del materiale.

La distorsione dei risultati può essere influenzata anche da malattie di natura infettiva: leptospirosi, febbre ricorrente, borreliosi causata da una puntura di zecca, alcune malattie tropicali dell'America Latina, dell'Africa (pinta, bejel). I loro agenti patogeni sono simili negli antigeni al treponema pallidum. Nello studio, danno una reazione falsamente positiva.

decodifica

La reazione di Wasserman è una tecnica per rilevare il treponema pallido nel corpo umano, basata sulla risposta del suo sistema immunitario all'invasione di una proteina simile nella composizione all'antigene dell'agente eziologico della sifilide. Un risultato negativo (negativo) indica l'assenza di batteri nel sangue del paziente ed è indicato da un segno "-" (meno). Positivo è scritto con un segno "+" (più).

Reazione Wasserman positiva

Un RW positivo indica che la cardiolipina, un antigene del treponema, è stata trovata nel siero del sangue umano.

Ciò è possibile alle seguenti condizioni:

• Il paziente è malato di sifilide.
• Il test ha dato una reazione falsamente positiva.
• Con sindrome da anticorpi antifosfolipidi.
• Entro un anno dal trattamento della sifilide.

In questo caso, viene sempre assegnato un riesame per rilevare gli anticorpi contro l'agente patogeno e altri metodi diagnostici.

A seconda del tempo di ritardo della reazione di emolisi, il risultato del test viene interpretato come segue:

Quantità "+"	Reazione	Emolisi degli eritrociti nel tempo	Numero di agenti patogeni
++++	Fortemente positivo	Non c'erano segni	Molto grande
+++	Positivo	Ritardo significativo	significativo
++	Debolmente positivo	Parziale	Piccolo
+	dubbioso	Insignificante	Pochissimo o il risultato è sbagliato

Il paziente viene cancellato dal registro dopo tre accertamenti consecutivi per la presenza del patogeno, analisi del liquido cerebrospinale ed esame da parte dei medici: un oculista, un neurologo e un otorinolaringoiatra.

La reazione falsa positiva di Wasserman

I falsi positivi RW possono essere innescati dall'interruzione del sistema endocrino e immunitario, dalla presenza di gravi malattie somatiche.

Si manifesta nelle seguenti infezioni e condizioni:

• Tubercolosi del sistema broncopolmonare.
• Malattie del tessuto connettivo.
• Malattie infettive: varicella, mononucleosi, parotite, morbillo.
• Durante il periodo di convalescenza e dopo la vaccinazione.
• Oncologia: linfoma, mieloma.
• Epatite, cirrosi epatica, infezione da HIV.
• Diabete.
• Malattie reumatiche e autoimmuni: lupus eritematoso sistemico, lebbra.
• Dopo un recente ictus, infarto.
• In caso di avvelenamento e intossicazione.
• Con brucellosi.
• Nelle donne durante le mestruazioni, la gravidanza, entro 2 settimane prima e dopo il parto.
• Nei neonati nei primi 10 giorni di nascita.
• Dopo aver mangiato cibi grassi, bevande alcoliche, fumare.

Inoltre, l'errore del risultato è influenzato dall'età avanzata del paziente (80+), dalla frequenza delle trasfusioni di emocomponenti nell'emofilia, dalla leucemia e dai farmaci iniettati.

In caso di risultato falso positivo fino a "++", è richiesto un esame del sangue ripetuto del paziente. Viene eseguito dopo alcune settimane o vengono utilizzati altri metodi diagnostici basati su moderni strumenti di laboratorio.

Reazione di Wasserman negativa

Caratterizza una persona sana (questo vale solo per le malattie a trasmissione sessuale e non si applica alle malattie somatiche), che non è stato infettato dalla sifilide.

Va notato che nelle prime 3 settimane dopo l'infezione da treponema pallido, la reazione di Wasserman mostra un risultato negativo. Ciò è dovuto alla piccola quantità di anticorpi nel sangue del paziente. Dopo 1,5 mesi, un test positivo viene mostrato nel 25% dei pazienti. Solo al culmine della malattia l'affidabilità si avvicina all'80-90%.

Il falso negativo RW è possibile durante il periodo della finestra grigio-negativa in qualsiasi fase della malattia, così come quando il sangue capillare viene prelevato da un dito.

Quali test fanno i pazienti in aggiunta?

Il criterio per la corretta diagnosi della sifilide è l'isolamento dell'agente eziologico della malattia o la presenza di anticorpi contro di essa.

I metodi di ricerca diretta includono:

• TMP - microscopia in campo oscuro. L'approccio diagnostico più affidabile. Il materiale è lo scarico dell'ulcera, l'erosione, il contenuto prelevato durante la puntura del linfonodo. In un campo scuro al microscopio, il treponema pallido appare sotto forma di spirale. La differenziazione da altri patogeni simili è data dalla morfologia del batterio e dai suoi movimenti caratteristici. Sulla base di questo, viene fatta una diagnosi.
• Fondo comune - immunofluorescenza diretta. È usato per studiare lo scarico dall'area delle lesioni della mucosa orale, del retto, del materiale ottenuto durante l'autopsia, della biopsia. La tecnica di analisi consiste nel posizionare i campioni su un vetrino; durante la microscopia a fluorescenza, un medico di laboratorio osserva un bagliore di luce verde brillante.
• PCR - reazione a catena della polimerasi. La tecnologia si basa sulla rilevazione del DNA dell'agente patogeno. La fonte è spinale, tissutale, amniotica, liquido seminale, sangue.

Vengono anche utilizzate reazioni ed esami come:

• RIF - immunofluorescenza.
• RPHA - emoagglutinazione passiva.
• RIBT - immobilizzazione di treponemi pallidi.
• ELISA - saggio di immunoassorbimento enzimatico.
• Immunoblotting.

Nel XX secolo. La reazione di Wasserman era l'unico modo per diagnosticare e monitorare il trattamento nei pazienti con sifilide. È un'analisi economica e veloce con un'alta percentuale di accuratezza. Attualmente sono state sviluppate nuove tecnologie di ricerca che danno meno risultati inaffidabili. Ma alcuni laboratori stanno ancora utilizzando questa tecnologia a causa della sua disponibilità.

Video sulla reazione di Wasserman

Esame del sangue RW: