Grazie allo sviluppo della medicina moderna, il medico nella diagnosi non hanno più bisogno di fare affidamento su manifestazioni indiretti della malattia o per il compimento di ricerche di laboratorio a più stadi. Abbastanza per tenere un test che confermare o smentire la presunta diagnosi iniziale.
Questo metodo è un saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) - questo studio rivela anticorpi e antigeni insiti in una varietà di patologie, che accelera sostanzialmente fisse Diagnosi impianto.
In questo articolo:
- 1 Qual è l'ELISA
- 2 tipi di immunoglobuline
- 3 Indicazioni per le immunoglobuline di analisi consegna
- 4 Preparazione per la consegna di analisi
- 5 La procedura per il prelievo di campioni
- 6 Come fare l'analisi
- 7 Quando l'analisi è pronto
- 8 I risultati dei test e la loro interpretazione
- 9 i risultati dei test significato
- 10 Pro e contro analisi
- 11 Perché il risultato può essere fuorviante
- 12 Il costo dello studio
- 13 Video del saggio ELISA
Qual è l'ELISA
analisi ELISA - è takoelaboratornoe studio (metodo), che contribuisce a determinare la presenza o l'assenza di anticorpi specifici nel corpo per combattere il virus e il loro numero.
La base dello studio è una reazione naturale ad un antigene (un corpo oggetto dannoso) - anticorpo (Protein distrugge malware) che permette di rilevare la presenza di una varietà di virus, batteri.
ELISA è una risposta immunitaria naturale - l'interazione dell'anticorpo con il corrispondente antigene. Così durante IFA nel tubo con il materiale aggiunto alternativamente antigeni o anticorpi, dopo di che è rilevazione della concentrazione dei complessi antigene-anticorpo risultante.
Se si sono formate le partite, poi ci sono i complessi immuni un'ulteriore reazione enzimatica si verifica con un materiale colorante molecola unita. È dovuto ad un cambiamento di colore nel corso dell'indicazione enzimatica avviene dopo l'identificazione di connessione definita livello studio sulla malattia.
tipi di immunoglobuline
immunoglobuline umane differenziano in diverse classi, diverse proprietà della struttura e le caratteristiche antigeniche delle catene pesanti (H-catene). In tutti i mammiferi, compresi gli esseri umani, isolato cinque H-catene, che determinano immunoglobuline appartenenti alla rispettiva classe: G, M, A, D, E.
Ogni classe si distingue gli uni dagli altri proprietà biologiche, e la capacità di legare gli antigeni, e la forza di velocità e il legame con la molecola.
Le funzioni di ogni immunoglobuline (Ig) sono diverse:
| Numero di corpo | funzioni | Half-life (giorni) | valore | |
| sol | 70% | Formare un'immunità passiva nel neonato; necessario per la risposta immunitaria migliorare la fagocitosi, |
21-24 | fornire lungo immunità umorale in malattie infettive |
| M | 5-10% | Abbiamo bisogno di attivare la fagocitosi, sono in grado di legarsi all'antigene 5 molecole |
5 | Esso fornisce una risposta immunitaria primaria |
| la | 10-15 | Neutralizzare le tossine e virus necessario per la formazione di immunità precoce La formazione di immunità locale |
4-5 | difesa della mucosa |
| E | 0,2% | provocare allergie e anafilassi attivato basofili tissue | 2 | Protezione contro i parassiti |
| D | 0,2% | coinvolti nello sviluppo dei linfociti, è necessario come recettore di membrana per l'antigene; | 3 | Il loro ruolo è poco studiato |
L'emergere della immunoglobulina avviene ad una sorta di "catena» - IgM IgG, in questo modo il corpo reagisce alla comparsa del corpo in l'antigene. Durante laboratorio diagnosi valuta la concentrazione di tre principali immunoglobulina - G, M, A.
Indicazioni per le immunoglobuline di analisi consegna
analisi ELISA sta diventando sempre più popolare ogni anno.
Tale ricerca accelera l'istruzione diagnosi, che è molto importante per il trattamento di patologie quali:
- epatite virale;
- infezione da HIV;
- citomegalovirus,
- virus di Epstein-Barr,
- herpes virus,
- morbillo
- rosolia,
- la tubercolosi,
- salmonellosi,
- dissenteria,
- zecche encefalite,
- batteri Helicobacter,
- la malattia di Lyme,
- tetano,
- la sifilide,
- difterite,
- leptospirosi,
- clamidia,
- ureaplasmosis,
- micoplasmosi,
- pertosse.
La stessa analisi può identificare l'infezione da parassiti:
- vermi piatti
- Ascaris
- amebe gistolicheskimi,
- tremadami fegato,
- Giardia,
- Toxoplasma,
- Trichinella,
- colpo di fortuna,
- cestodosis.
ELISA è un indicatore unico per le patologie autoimmuni e tumori.
Preparazione per la consegna di analisi
In preparazione per lo studio dovrebbero rispettare queste regole:
- un giorno prima della prelievo di sangue non può fumare e bere alcolici,
- non impegnarsi in sport o altre attività fisiche,
- cercare di evitare lo stress
Prima di passare analisi ELISA, è necessario evitare lo stress. - per fermare l'uso di farmaci non più tardi di 10 giorni prima della procedura.
Gli stessi medici raccomandano di attenersi a una dieta speciale - di escludere cibi grassi e fritti, e se ricerca condotta su epatite, non si dovrebbe mangiare le verdure di colore arancione, e, soprattutto, agrumi. donare sangue deve essere al mattino a stomaco vuoto.
Analisi Falso positivo è dovuto alle raccomandazioni in sospeso, in particolare grassi alimentari, Si sta portando a eccessivamente alte concentrazioni di trigliceridi nel plasma, a causa della quale la conduttività ELISA diminuisce.
La procedura per il prelievo di campioni
Nel sangue intero, siero o plasma del sangue venoso possono essere usati come materiale di prova. materiale recinzione, solitamente effettuata dalla vena cubitale viene utilizzato per questo scopo ago monouso e un tubo a vuoto, 5-10 ml di sangue è necessario.
Per risultati accurati, è importante aderire alla corretta tecnica di campionamento - una puntura del vaso e del tessuto circostante deve essere effettuato uno manipolazione, in modo che utilizza un ago corto con un diametro maggiore, in modo che non danneggi la parete opposta della vena e non danneggiato eritrociti.
Solo per preservare l'integrità dei globuli rossi, è necessario che il sangue gocciolare le pareti dei tubi.
Durante la conservazione, il materiale deve essere evitato il più possibile ionizzazione inoltre il materiale non deve essere in contatto con residui disinfettanti, così utilizzati solo plastica monouso flacone etichettato nome del paziente, data e ora di consegna materiale.
Se lo si desidera una breve conservazione del materiale, la camera di refrigerazione è utilizzato con una temperatura di 2-4 suC, se necessario, un lunga conservazione, il materiale è congelato a -20 suS.
Come fare l'analisi
Dopo la preparazione del materiale ricavato assistente medico per le manipolazioni necessarie. A questo scopo, una serie di gruppi speciali di antigeni, ammainare proprietà provocare risposte del corpo a uno stimolo è una varietà di infezioni, ormoni, allergeni.
Scheme "antigene-anticorpo" atteso risposta simile a questa:
- reazione iniziale - definito Ig (Ab) e l'antigene purificato patogeno (Ag).
- Per il rilevamento dei complessi immuni risultanti seguita nuova reazione immunologica cui atti specifici antigeni associati Ig, ed anticorpi sporge konyugat- Ig (Ab).
- L'ultima tappa - la reazione enzimatica, insieme con il coniugato molecola catalizzatore. Il substrato agisce come cromogeno (colorati), che durante la reazione è colorata, e l'intensità del colore viene determinata e indice quantitativo di un'immunoglobulina in un campione.
Allo stato attuale, sviluppato un'ampia gamma di varianti ELISA, una chiara classificazione di loro è mancante. Tipicamente, i metodi sono considerati sulla base della sua separazione in etero ed omogenea - tutto fase di analisi che avviene tramite la fase solida o utilizzando unica soluzione.
I moderni laboratori diagnostici clinici utilizzano in genere un eterogeneo (fase solida), ELISA, si intende un assorbimento in fase solida antigeni o anticorpi sulla superficie solida di appositi fori sul metodo polistirene micropiastra è diviso in diretta e indiretta ELISA.
Nel ELISA diretto, l'antigene introdotto dalle correzioni durante il processo di incubazione in pozzetti vuoti superficiali per questo il materiale campione viene posto in pozzetti puliti per 20-25 minuti, è necessario associare al loro antigene superficie. Successivamente l'aggiunta dell'anticorpo desiderato. Inoltre, il materiale rimane per un certo tempo per formare legami.
Gli anticorpi sono sempre aggiunti in eccesso, quindi, anche se presenti nel campione non sono associati antigeni, e antigeni, se non affatto, i collegamenti non saranno. Per rimuovere l'anticorpo "extra" è condotto da decantazione, lasciando solo quegli anticorpi che hanno stabilito la comunicazione con l'antigene.
Questo è seguito dalla reazione enzimatica - aggiunta ai pozzetti con soluzione enzimatica, dopo di che la tintura avviene derivato legami.
Nelle anticorpi metodo ELISA indiretto usate in anticipo connessa al substrato della reazione enzimatica; in questo caso l'accoppiamento di anticorpi all'antigene si verifica durante il processo di incubazione, che ha luogo dopo mobilitazione di legami sui fori di superficie e riempito nella successiva coniugato e substrato colorante reattivo cromogeno reazione.
Pertanto, la differenza principale dal diretto del metodo indiretto non è materiale sulla superficie di adesione pulire i pozzetti, e il legame all'antigene immobilizzato sulla piastra.
Interrompe la reazione utilizzando dispositivi specializzati, ogni pozzetto viene sottoposto ad ulteriore processo fotometria, seguita da analisi comparativa dei risultati ottenuti con precedentemente effettuata controllo campioni.
Se l'aumento di densità ottica rilevata nel campione è poi gonfiato e la concentrazione di anticorpi specifici nel risultato del test.
Quando l'analisi è pronto
Lo studio non prende un sacco di tempo dalla raccolta del sangue per ottenere il risultato va da 1 a 10 giorni, a seconda delle misure diagnostiche.
I risultati dei test e la loro interpretazione
Nel modulo, un risultato ottenuto diagnosticando paziente indica un negativo o positivo alcune classi di immunoglobuline, come misura quantitativa indicato di varie classi anticorpi.
Diversa interpretazione dei risultati:
- IgM (+) (IgA, IgG sono stati non rilevato) - processo di guarigione;
- IgM (-); IgG (+), IgA (+) - patologia infettiva cronica;
- IgM, IgG, IgA (tutto s - valore) - meccanismi di difesa all'infezione;
- IgG (+/-) e IgA (+/-), IgM (+) - processo acuto;
- IgM (-), IgA (-), IgG (+) - immunità postinfettiva;
- IgM, IgG, IgA (+) - patologia cronica in fase acuta.
Ad esempio, se il rilevato erano IgG e IgM, il paziente può avere una di queste malattie:
- epatite virale;
- citomegalovirus;
- herpes;
- varicella;
- clamidia;
- stafilococco o di infezione da streptococco.
Immunoenzimatico è spesso prescritto per gli studi ormonali, le regole sono riportati nella seguente tabella:
| Il nome di ormone | Paul | norma | |
| 1 | tireoglobulina | m / f | A 70 IU / ml |
| 2 | tiroxina | m / f | 64-146 nmol / L |
| 3 | triiodotironina | m / f | 1,8-2,8 nmol / l |
| 4 | tiroxina libera | m / f | 11-25 pmol / L |
| 5 | triyodritonin gratis | m / f | pmol 4,49-9,3 / L |
| 6 | Il testosterone, diidrotestosterone | F | 0,5-10 mIU / l |
Analisi ELISA - si tratta di un test diagnostico che valuta la probabilità di cancro. Tuttavia, l'interpretazione dei risultati è effettuata solo dal medico curante.
i risultati dei test significato
ELISA per la rilevazione di varie forme di infezioni trasmesse sessualmente, tra cui la sifilide, ed è spesso usato per lo screening delle donne in gravidanza.
Attraverso questo studio si può imparare dell'infezione e lo stadio della malattia al momento dello studio:
- immunoglobuline M dire sulla durata della malattia;
- IgA - il paziente è stato infettato da più di 30 giorni fa;
- IgG si trova sulla malattia "picco", o in un momento in cui la terapia di recente si è conclusa.
I pozzi di studio sulla piastra con un indice negativo è incolore e positive verniciato nel colore giallo brillante. Se il colore dei pozzetti positivi è diverso dal colore del controllo, il risultato è considerato dubbio e deve essere ri-studio.
Saggio di immunoassorbimento - è il primo passo nella diagnosi di HIV. L'analisi non può essere immediatamente dopo la presunta infezione deve attendere la fine del periodo di incubazione (da 14 giorni a 6 mesi).
Durante l'analisi di anticorpi anti HIV-1 e HIV-2, c'è una ricerca AT classe G, che normalmente appare sulla fasi successive e in classe A e M, possono essere definiti nelle fasi (durante l'incubazione periodo).
seguito al ricevimento di campioni positivi:
- Se il primo test è stato positivo, il sangue ancora una volta ricontrollato da un altro assistente di laboratorio;
- un secondo risultato positivo suggerisce materiale resit
- il risultato ripetizione, il paziente viene assegnato immunoblotting.
La conclusione finale circa la presenza di infezione da HIV è rilasciato solo dopo il risultato di immunoblotting.
ELISA è anche usato come studio diagnostico della tubercolosi, ma se il paziente ha avuto anche anticorpi contro questa malattia, non è conferma sempre la presenza del suo tubercolosi, quindi la VIA viene spesso usata come metodo per specificare sia la stessa per la diagnosi extrapolmonare latente modulo.
analisi ELISA - è uno studio che permette di rilevare un paziente infettato con parassiti e protozoi, nel corso di diagnosi può essere determinato anche il momento dell'infezione.
| clamidia | citomegalovirus | parassiti |
| IgM Rileva 7 giorni dopo l'infezione, | IgM rilevata 30-45 giorni dopo l'infezione o durante la riattivazione di infezione per 4-6 mesi | Lo studio ha determinato IGME. IgG fase cronica dell'infezione |
| IgA - infezione si è verificato più di 30 giorni fa | ||
| IgG - invasione è in fase acuta | ||
| IgG - conferma la diagnosi e mostra l'efficacia |
Pro e contro analisi
IFA ha molti vantaggi, il che spiega la sua popolarità tra medici e pazienti, è:
- elevata precisione del risultato,
- prezzo ragionevole,
- risultati rapidi,
- rivelando lo stadio della malattia,
- controllo della dinamica della malattia.
Tuttavia, alla pari con i vantaggi e svantaggi esistono - in rari casi, l'analisi è falso positivi o falsi negativi.
Perché il risultato può essere fuorviante
Gli errori possono verificarsi a causa a causa di violazioni tecniche, la stessa analisi è inaffidabile nelle persone con alcune malattie croniche (fattore reumatoide) per cui la caratteristica è lo sviluppo di specifici anticorpi.
Anche sul risultato finale è influenzato dall'uso di disturbi del metabolismo del farmaco e paziente. Per queste ragioni, un risultato positivo per l'HIV e la patologia del cancro richiede prove di ri-messa in servizio.
Il costo dello studio
IFA Il prezzo varia a seconda delle aree di diagnostica (rub.):
- epatite 250 -900;
- I virus - 250 -1000;
- HIV - 250-350;
- verme infestazione - 280-900;
- Sifilide -150-250;
- infezioni fungine 400-500.
Saggio Immunoenzimatico sangue è uno dei metodi più efficaci di ricerca di molte patologie virali, infezioni parassitarie, patologie oncologiche. Tale ricerca come l'IFA facilita in gran parte la dichiarazione di diagnosi, tuttavia, questa analisi non dovrebbe essere interpretata in modo indipendente dal paziente, deve essere impegnato a decifrare un medico.
Autore di questo articolo: Bacio
Registrazione di questo articolo: Lozinski Oleg
Video del saggio ELISA
Come è l'analisi ELISA: