Reacția lui Wasserman (RW). Ce este această analiză, cum să o luăm, cât se face în timp

În 1906 g. imunolog și microbiolog de origine germană A. NS. von Wassermann în colaborare cu A. L. CU. Neisser a dezvoltat un test pentru diagnostic de sifilis. Aceasta este o reacție care detectează prezența anticorpilor la agentul cauzal al bolii. În prezent, abordarea clasică a cercetării este puțin utilizată, dar toate metodele care vizează identificarea bolii sunt numite după creatorul acesteia.

Esența analizei

Sifilisul este o boală cu transmitere sexuală de natură infecțioasă. Este cauzat de treponema palidă și se caracterizează printr-un curs periodic, deteriorarea membranelor mucoase, a pielii, a aparatului locomotor și a organelor interne.

Are următoarele căi de transmisie:

• Sexual: este cel mai frecvent.
• Contact-gospodărie: copiii părinților cu sifilis se infectează în acest fel.
• Transfuzie: după transfuzia de sânge și componentele sale de la un donator cu un agent cauzal în organism.
• Transplacentar: transmis la făt prin placentă de la mamă în timpul sarcinii.
• Profesionist: personalul medical se infectează atunci când efectuează manipulări cu persoane infectate cu treponema palidă: chirurgi, obstetricieni-ginecologi, dentiști.

Agentul cauzal al bolii rămâne activ în secrețiile proaspete ale persoanei infectate, cum ar fi: saliva, urina și alte fluide fiziologice.

Prin forma sa, sifilisul este împărțit în:

• Primar. Apare după infecția cu treponema palidă. Perioada de incubație este de 6-8 săptămâni de la momentul infecției. Se caracterizează prin formarea ulcerativă la locul introducerii agentului patogen, o creștere a ganglionilor limfatici submandibulari sau inghinali. O reacție pozitivă este diagnosticată în 8 din 10 cazuri.
• Secundar. Caracterizată printr-o erupție palidă pe tot corpul, inclusiv suprafața palmară și plantară, simptome de intoxicație, caracteristice unei infecții respiratorii. Este detectat în aproape 100% din cazuri.
• Terţiar. La 1/3 din pacienți, testul RW dă un rezultat negativ. La o persoană bolnavă, scheletul osos este afectat, provocând deformarea acestuia, organele interne și sistemul nervos.
• Bacterii purtătoare. O persoană se infectează cu treponema palidă, un răspuns imun puternic al corpului suprima reproducerea sa activă, dar nu poate distruge complet infecția. În acest caz, nu există simptome ale bolii, dar purtătorul este periculos pentru persoanele cu care contactează.

Reacția Wasserman este un studiu serologic care se realizează printr-o metodă expresă. Celălalt nume al acestuia: test de sânge pentru RW. Studiul materialului pentru sifilis se bazează pe identificarea anticorpilor specifici care sunt produși sistemul imunitar al corpului uman ca răspuns la invazia antigenelor străine în sânge, provocându-le moarte.

Agentul cauzal al bolii conține o proteină nespecifică numită cardiolipină. Industria medicală o primește din inimile vitelor și o eliberează gata făcută cu instrucțiuni. La efectuarea unui studiu, acesta este adăugat într-o eprubetă care conține material biologic (ser). antigen, formând legături puternice între anticorpi și proteinele imunității înnăscute (complement) a sângelui pacientul. Apoi compoziția este supusă hemolizei, după care rezultatele sunt evaluate.

Analiza pentru RW indică și remediază procesul autoimun care a fost declanșat în corpul uman de treponema pallidum.

Sângele pentru cercetare este preluat numai dintr-un vas venos în cantitate de 5-10 ml. Manipularea se efectuează în condițiile camerei de tratament din policlinică, centru de diagnostic sau spital.

Ce poate arăta?

Testul RW se bazează pe răspunsul de legare a complementului. Scopul său: identificarea anticorpilor împotriva agentului cauzal al bolii.

Testarea sifilisului ajută:

• Pentru a stabili un diagnostic al bolii în prima etapă.
• Determinați durata infecției.
• Descoperiți infecția în cursul latent (latent) al bolii.
• Monitorizați tratamentul.
• Examinați persoanele care au contact cu o persoană bolnavă pentru a afla purtătorul agentului patogen.

Indicații pentru cercetare

Reacția Wasserman este un test de sânge care se efectuează pentru diagnosticarea și examinarea următoarelor grupuri de persoane:

• Profesioniști din domeniul medical și personalul spitalului.
• Persoane asociate cu produsele alimentare (cultivare, vânzare, prelucrare): lucrează în instituțiile preșcolare și școlare.
• Persoane care, de profesie, au contact cu materiale contaminate.
• Donatori de materiale fiziologice ale corpului.
• Infectați cu HIV, dependenți de droguri și care duc un stil de viață asocial.
• Pacienții care urmează tratament într-un spital, precum și cei cărora li se prescrie o operație.
• Cu febră prelungită de origine necunoscută.
• Titulari de bonuri de sanatoriu.
• Femeile gravide sunt examinate de mai multe ori pe parcursul întregii perioade.
• Copiii nou-născuți să identifice sifilisul congenital.
• După contactul sexual cu o cunoștință ocazională fără utilizarea unui echipament de protecție (prezervativ).
• Dacă suspectați o infecție cu treponem: ulcere în zona genitală, ganglioni limfatici măriti, erupții cutanate.
• La efectuarea unui examen medical anual.
• Pentru pacienții care urmează tratament pentru sifilis, pentru a urmări dinamica bolii și eficacitatea tratamentului pentru corectarea sa în timp util.

În perioada de a avea un copil

Femeilor însărcinate li se prescrie un test de sânge pentru RW de 3 ori:

1. Când aplicați pentru prima dată pentru sarcină și înregistrare.
2. La 13 săptămâni de gestație.
3. La internarea în spital.

O femeie care a avut sifilis ar trebui să se abțină de la conceperea unui copil timp de 5 ani. Trebuie să știți că reacția Wasserman la purtarea unui făt la 1,5 din 100 de femei însărcinate este fals pozitivă. Prin urmare, medicul prescrie o a doua analiză. La confirmarea infecției cu treponema, pacientul are nevoie de tratament pentru a proteja fătul de infecție și pentru a preveni moartea intrauterină.

Câte zile durează analiza?

Reacția Wasserman este o metodă legată de diagnosticarea expresă pentru identificarea agentului cauzal al sifilisului. Studiul în mod clasic se realizează în timpul zilei, după care medicul primește datele de analiză. Excepția o fac policlinicile raionale. Datorită îndepărtării lor de laboratoarele dispensarului dermatovenos, analiza va trebui să aștepte până la 2 săptămâni (acest lucru se datorează faptului că materialul este transportat și rezultatele sunt livrate în zilele stabilite).

În prezent, metoda PCR (reacția în lanț a polimerazei) este utilizată pe scară largă. Este un studiu precis pentru identificarea agentului cauzal al bolii. Fiabilitatea sa ajunge la aproape 100%. Rezultatul este cunoscut după 5 ore. după ce a luat material biologic. Dezavantaj: preț ridicat. Prin urmare, analizele sunt disponibile clinicilor private.

Cât timp este valabilă analiza?

Durata fiabilității rezultatelor pentru reacția RW nu depășește 3 luni. Cel mai adesea, analiza se efectuează în timpul unui examen medical preventiv o dată pe an. Trebuie remarcat faptul că, în perioada de incubație, agentul patogen nu poate fi detectat, deoarece sângele conține o cantitate foarte mică de anticorpi. Un test pozitiv este posibil la 4 săptămâni după pătrunderea treponemului pal în corpul uman.

Pregătirea pentru analiză

Reacția Wasserman este una dintre metodele de cercetare de laborator și necesită îndeplinirea condițiilor necesare în pregătirea pentru colectarea biomaterialului. Acest lucru este necesar pentru a elimina erorile care afectează rezultatul.

Înainte de testarea sângelui pentru RW, trebuie luați în considerare următorii factori:

• Sângele este luat în prima jumătate a zilei strict pe stomacul gol sau abstinența de la masă ar trebui să fie în decurs de 6 ore, deoarece fiabilitatea este influențată de enzimele sistemului digestiv.
• Cu o zi înainte de examinare, nu trebuie să consumați: cafea și băuturi cu cofeină, sucuri de fructe, alimente grase, alcool. Trebuie să vă abțineți de la tutun imediat înainte de a lua sânge.
• Nu este recomandat să luați medicamente timp de 24 de ore, în special cele care conțin digitală și antibiotice. Medicul trebuie informat cu privire la medicamentele vitale, astfel încât să poată lua în considerare acest lucru la decodarea rezultatului.
• În ajunul efectuării unei analize, trebuie să se abțină de la stres fizic, emoțional.
• Puteți bea apă fără gaz sau fiert.

Cum se desfășoară procedura

Pentru a verifica o persoană pentru prezența agentului patogen al treponemului pal în corpul său, este necesar sânge prelevat dintr-o venă.

Secvențierea:

1. În timpul colectării materialului, pacientul trebuie să mintă sau să stea.
2. Un garou medical este tras peste brațul său deasupra cotului.
3. Locul viitoarei puncții este tratat cu un șervețel înmuiat în 70% alcool.
4. Un ac este introdus în vasul venos și conectat la un tub de vid. Cu ajutorul unui vid, se extrag 5-10 ml de sânge.
5. După injectare, rana este presată cu un material care conține alcool. Pentru a preveni sângerarea, brațul este îndoit la cot pentru câteva minute sau o asistentă îi aplică un bandaj de fixare strâns.
6. Atunci când se efectuează o analiză la copii sub un an, se folosesc vene pe capul copilului.
7. O eprubetă cu masă de sânge este trimisă la laborator pentru testarea anticorpilor împotriva agentului patogen. Depozitarea se face la frigider timp de cel mult 48 de ore.

Tehnica de cercetare:

1. Serul este separat de sângele prelevat prin centrifugare.
2. Este împărțit în 3 porțiuni, dintre care una este martorul, iar celelalte 2 sunt injectate cu antigenul cardiolipinei. Apoi eprubetele sunt plasate într-un termostat cu o temperatură de + 37 ° C timp de 1 oră, timp în care se creează legături puternice în materialul biologic dintre anticorpi și medicamentul injectat.
3. Compoziția suferă hemoliză prin intermediul substanțelor chimice. După 30-60 de minute. evaluează: distrugerea și hemoliza eritrocitelor mărturisește un rezultat negativ. Absența sau încetinirea reacției în comparație cu proba martor indică apariția unei reacții de legare a anticorpilor la antigen. Stadiul bolii este evaluat de timpul de întârziere.

   

Rezultatele analizei sunt trimise medicului care a prescris examenul sau sunt înmânate pacientului atunci când merg în mod independent la laboratorul medical.

Probabilitatea de eroare în rezultate

Eroarea ajunge la 10-20% din cazuri.

Este legat de:

• Prezența bolilor somatice care afectează compoziția sângelui.
• Caracteristicile corpului uman.
• Prezența unui curs latent de sifilis, care este combinat cu o altă patologie.
• Neglijarea de către pacient a recomandărilor înainte de prelevare.
• Calificări insuficiente ale tehnicienilor de laborator: acțiuni eronate atunci când se iau sânge, se depozitează și se transportă.
• Utilizarea reactivilor care au expirat.
• Distribuția inegală a antigenului într-o eprubetă, neutilizarea probelor de sânge de control în studiul materialului.

Distorsiunea rezultatelor poate fi influențată și de boli de natură infecțioasă: leptospiroza, febra recidivantă, borrelioza cauzată de mușcătura de căpușă, unele boli tropicale din America Latină, Africa (halbă, bejel). Agenții lor patogeni sunt similari în antigeni cu treponema pallidum. În studiu, ei dau o reacție fals pozitivă.

Decodare

Reacția Wasserman este o tehnică pentru detectarea treponemelor palide în corpul uman, bazată pe răspunsul sistemului său imunitar la invazia unei proteine ​​similare în compoziție cu antigenul agentului cauzal al sifilisului. Un rezultat negativ (negativ) indică absența bacteriilor în sângele pacientului și este indicat printr-un semn „-” (minus). Pozitiv se scrie cu semnul „+” (plus).

Reacție pozitivă a lui Wasserman

Un RW pozitiv indică faptul că cardiolipina, un antigen treponematic, a fost găsit în serul de sânge uman.

Acest lucru este posibil în următoarele condiții:

• Pacientul este bolnav de sifilis.
• Testul a dat o reacție fals pozitivă.
• Cu sindromul antifosfolipidic.
• În termen de un an după tratamentul sifilisului.

În acest caz, o reexaminare este întotdeauna atribuită pentru detectarea anticorpilor împotriva agentului patogen și a altor metode de diagnostic.

În funcție de timpul de întârziere al reacției de hemoliză, rezultatul testului este interpretat după cum urmează:

Cantitate „+”	Reacţie	Hemoliza eritrocitelor în timp	Numărul agentului patogen
++++	Foarte pozitiv	Nu existau semne	Foarte mare
+++	Pozitiv	Întârziere semnificativă	Semnificativ
++	Slab pozitiv	Parțial	Mic
+	Dubios	Nesemnificativ	Foarte puțin sau rezultatul este greșit

Pacientul este scos din registru după trei studii consecutive pentru prezența agentului patogen, analiza lichidului cefalorahidian și examinarea de către medici: oftalmolog, neurolog și otorinolaringolog.

Reacția fals pozitivă a lui Wasserman

RW fals pozitiv poate fi declanșat de întreruperea sistemului endocrin și imunitar, a prezenței bolilor somatice severe.

Se manifestă prin următoarele infecții și afecțiuni:

• Tuberculoza sistemului bronhopulmonar.
• Boli ale țesutului conjunctiv.
• Boli infecțioase: varicela, mononucleoza, oreionul, rujeola.
• În perioada de convalescență și după vaccinare.
• Oncologie: limfom, mielom.
• Hepatită, ciroză hepatică, infecție cu HIV.
• Diabet.
• Boli reumatice și autoimune: lupus eritematos sistemic, lepră.
• După un accident vascular cerebral recent, infarct.
• În caz de otrăvire și intoxicație.
• Cu bruceloză.
• La femei în timpul menstruației, sarcinii, în termen de 2 săptămâni înainte și după naștere.
• La sugari în primele 10 zile de la naștere.
• După ce ai mâncat alimente grase, băuturi alcoolice, fumat.

De asemenea, eroarea rezultatului este influențată de vârsta înaintată a pacientului (80+), de frecvența transfuziei componentelor sanguine în hemofilie, leucemie și medicamente injectate.

În cazul unui rezultat fals pozitiv până la „++”, este necesar un test de sânge repetat al pacientului. Se efectuează după câteva săptămâni sau se utilizează alte metode de diagnostic bazate pe instrumente moderne de laborator.

Reacție negativă a lui Wasserman

Caracterizează o persoană sănătoasă (aceasta se aplică numai bolilor cu transmitere sexuală și nu se aplică bolilor somatice), care nu a fost infectată cu sifilis.

Trebuie remarcat faptul că în primele 3 săptămâni după infecția cu treponema palidă, reacția Wasserman arată un rezultat negativ. Acest lucru se datorează cantității mici de anticorpi din sângele pacientului. După 1,5 luni, un test pozitiv este prezentat la 25% dintre pacienți. Doar la înălțimea bolii, fiabilitatea se apropie de 80-90%.

RW fals negativ este posibil în perioada ferestrei negativ-gri în orice stadiu al bolii, precum și atunci când sângele capilar este luat de la deget.

Ce teste fac pacienții suplimentar?

Criteriul pentru diagnosticul corect al sifilisului este izolarea agentului cauzal al bolii sau prezența anticorpilor la aceasta.

Metodele de cercetare directă includ:

• TMP - microscopie în câmp întunecat. Cea mai fiabilă abordare diagnostic. Materialul este deversarea din ulcer, eroziune, conținutul luat în timpul puncției ganglionului limfatic. Într-un câmp întunecat la microscop, treponema palidă apare sub formă de spirală. Diferențierea de alți agenți patogeni similari se face prin morfologia bacteriei și mișcările sale caracteristice. Pe baza acestui fapt, se pune un diagnostic.
• Fond reciproc - imunofluorescență directă. Se utilizează pentru a studia deversarea din zona leziunilor mucoasei bucale, rectului, materialului obținut în timpul autopsiei, biopsiei. Tehnica de analiză constă în plasarea probelor pe o lamă de sticlă; în timpul microscopiei cu fluorescență, un medic de laborator observă o strălucire de lumină verde strălucitoare.
• PCR - reacția în lanț a polimerazei. Tehnologia se bazează pe detectarea ADN-ului agentului patogen. Sursa este coloana vertebrală, țesut, amniotic, lichid seminal, sânge.

De asemenea, sunt utilizate reacții și examinări precum:

• RIF - imunofluorescență.
• RPHA - hemaglutinare pasivă.
• RIBT - imobilizarea treponemului palid.
• ELISA - test imunosorbent legat de enzime.
• Imunoblotarea.

În secolul XX. Reacția lui Wasserman a fost singura modalitate de a diagnostica și monitoriza tratamentul la pacienții cu sifilis. Este o analiză ieftină și rapidă, cu un procent ridicat de precizie. În prezent, au fost dezvoltate noi tehnologii de cercetare care oferă mai puține rezultate nesigure. Dar unele laboratoare folosesc încă această tehnologie din cauza disponibilității sale.

Video despre reacția Wasserman

Test de sânge RW: