Wasserman -reaktion (RW). Vad är denna analys, hur man tar den, hur mycket görs i tid

År 1906 g. immunolog och mikrobiolog av tyskt ursprung A. NS. von Wassermann i samarbete med A. L. MED. Neisser utvecklade ett test för diagnos av syfilis. Detta är en reaktion som upptäcker närvaron av antikroppar mot sjukdomens orsakande medel. För närvarande används det klassiska forskningssättet lite, men alla metoder som syftar till att identifiera sjukdomen är uppkallade efter dess skapare.

Kärnan i analysen

Syfilis är en sexuellt överförbar sjukdom av infektiös natur. Det orsakas av blekt treponem och kännetecknas av en periodisk kurs, skador på slemhinnorna, huden, muskuloskeletala systemet och inre organ.

Den har följande överföringsvägar:

• Sexuellt: är det vanligaste.
• Kontakt-hushåll: barn från föräldrar med syfilis blir smittade på detta sätt.
• Transfusion: efter transfusion av blod och dess komponenter från en donator med ett orsakande medel i kroppen.
• Transplacental: överförs till fostret genom moderkakan från modern under graviditeten.
• Professionell: medicinsk personal blir smittad när man utför manipulationer med personer som är infekterade med blek treponema: kirurger, obstetrikare-gynekologer, tandläkare.

Det orsakande medlet för sjukdomen förblir aktivt i färska sekret från den infekterade personen, såsom: saliv, urin och andra fysiologiska vätskor.

Genom sin form är syfilis uppdelad i:

• Primär. Det uppstår efter infektion med blek treponema. Inkubationstiden är 6-8 veckor från infektionen. Det kännetecknas av ulcerös bildning vid introduktionsstället för patogenen, en ökning av submandibulära eller inguinala lymfkörtlar. En positiv reaktion diagnostiseras i 8 av 10 fall.
• Sekundär. Karakteriseras av ett blekt utslag över hela kroppen, inklusive handflatan och plantarytan, symptom på förgiftning, karakteristiska för en luftvägsinfektion. Det upptäcks i nästan 100% av fallen.
• Tertiär. Hos 1/3 av patienterna ger RW -testet ett negativt resultat. Hos en sjuk person påverkas benskelettet, vilket orsakar dess deformation, inre organ och nervsystemet.
• Bärarbakterier. En person blir infekterad med blekt treponema, ett starkt immunsvar från kroppen undertrycker dess aktiva reproduktion, men kan inte helt förstöra infektionen. I det här fallet finns det inga symptom på sjukdomen, men bäraren är farlig för de personer som han kommer i kontakt med.

Wasserman -reaktionen är en serologisk studie som utförs med en expressmetod. Dess andra namn: blodprov för RW. Studien av material för syfilis är baserad på identifiering av specifika antikroppar som produceras immunsystemet i människokroppen som svar på invasionen av främmande antigener i blodomloppet, vilket orsakar dem död.

Det orsakande medlet för sjukdomen innehåller ett ospecifikt protein som kallas kardiolipin. Läkemedelsindustrin tar det från nötkreaturs hjärtan och släpper det färdigt med instruktioner. Vid genomförande av en studie i ett provrör innehållande biologiskt material (serum), detta antigen, som bildar starka bindningar mellan antikroppar och proteiner av medfödd immunitet (komplement) av blodet patienten. Sedan utsätts kompositionen för hemolys, varefter resultaten utvärderas.

Analysen för RW indikerar och fixar den autoimmuna processen som utlöstes i människokroppen av treponema pallidum.

Blod för forskning tas endast från ett venöst kärl i mängden 5-10 ml. Manipulationen utförs under förhållandena i behandlingsrummet på polikliniken, diagnoscentret eller sjukhuset.

Vad kan den visa?

RW -analysen är baserad på komplementbindningssvaret. Dess syfte: att identifiera antikroppar mot sjukdomens orsakande medel.

Syfilis testning hjälper:

• Att fastställa en diagnos av sjukdomen i sitt första skede.
• Bestäm varaktigheten av infektionen.
• Avslöja infektion i latent (latent) sjukdomsförlopp.
• Övervaka behandlingen.
• Undersök personer som har kontakt med en sjuk person för bäraren av patogenen.

Indikationer för forskning

Wasserman -reaktionen är ett blodprov som utförs för diagnos och undersökning av följande grupper av människor:

• Läkare och sjukhuspersonal.
• Personer som är associerade med mat (odling, försäljning, bearbetning): arbetar i förskola och skolinstitutioner.
• Personer som av yrke har kontakt med förorenat material.
• Givare av kroppens fysiologiska material.
• HIV-infekterade, drogmissbrukare och leder en asocial livsstil.
• Patienter som genomgår behandling på ett sjukhus, liksom de som förskrivs en operation.
• Med långvarig feber av okänt ursprung.
• Innehavare av sanatoriumskuponger.
• Gravida kvinnor undersöks flera gånger under hela perioden.
• Nyfödda barn för att identifiera medfödd syfilis.
• Efter samlag med en tillfällig bekant utan användning av skyddsutrustning (kondom).
• Om du misstänker infektion med treponema: sår i underlivet, förstorade lymfkörtlar, hudutslag.
• Vid årlig medicinsk undersökning.
• För patienter som genomgår behandling för syfilis, för att spåra sjukdomens dynamik och behandlingens effektivitet för dess rätta korrigering.

Under barndomsperioden

Gravida kvinnor ordineras ett blodprov för RW 3 gånger:

1. När du först ansöker om graviditet och registrering.
2. Vid 13 veckors dräktighet.
3. Vid inläggning till sjukhuset.

En kvinna som har haft syfilis bör avstå från att bli barn i 5 år. Du bör veta att Wasserman -reaktionen när du bär ett foster hos 1,5 av 100 gravida kvinnor är falskt positiv. Därför föreskriver läkaren en andra analys. Vid bekräftelse av infektion med treponema behöver patienten behandling för att skydda fostret från infektion och förhindra intrauterin död.

Hur många dagar tar analysen?

Wasserman -reaktionen är en metod relaterad till expressdiagnostik för att identifiera syfilis orsakande medel. Studien på det klassiska sättet genomförs under dagen, varefter läkaren får analysdata. Undantaget är distriktspoliklinikerna. På grund av deras avlägsenhet från laboratorierna i den dermatovenösa apoteket måste analysen vänta upp till 2 veckor (detta beror på att materialet transporteras och resultaten levereras på bestämda dagar).

Numera används PCR -metoden (polymeraskedjereaktion) i stor utsträckning. Det är en noggrann studie för att identifiera orsaken till sjukdomen. Dess tillförlitlighet når nästan 100%. Resultatet är känt efter 5 timmar. efter att ha tagit biologiskt material. Nackdel: högt pris. Därför är analys tillgänglig för privata kliniker.

Hur länge är analysen giltig?

Varaktigheten av tillförlitligheten av resultaten för RW -reaktionen överstiger inte 3 månader. Oftast utförs analysen under en förebyggande medicinsk undersökning en gång om året. Det bör noteras att under inkubationstiden kan patogenen inte detekteras, eftersom blodet innehåller en mycket liten mängd antikroppar. Ett positivt test är möjligt 4 veckor efter penetration av blekt treponema i människokroppen.

Förberedelse för analys

Wasserman -reaktionen är en av laboratorieforskningsmetoderna och kräver att de nödvändiga villkoren uppfylls för att förbereda insamling av biomaterial. Detta är nödvändigt för att eliminera fel som påverkar resultatet.

Innan du testar blod för RW bör följande faktorer beaktas:

• Blod tas under den första halvan av dagen strikt på tom mage eller avhållsamhet från att äta ska vara inom 6 timmar, eftersom tillförlitligheten påverkas av matsmältningssystemets enzymer.
• Dagen före undersökningen får du inte konsumera: kaffe och koffeinhaltiga drycker, fruktjuicer, fet mat, alkohol. Du måste avstå från tobak omedelbart innan du tar blod.
• Det rekommenderas inte att ta mediciner i 24 timmar, särskilt de som innehåller digitalis och antibiotika. Läkaren bör meddelas om vitala läkemedel så att han kan ta hänsyn till detta vid avkodning av resultatet.
• På kvällen före analysen måste man avstå från fysisk, känslomässig stress.
• Du kan dricka vatten utan gas eller kokt.

Hur utförs proceduren

För att kontrollera en person för närvaron av patogenen av blek treponema i kroppen behövs blod som tas från en ven.

Sekvensering:

1. Under insamlingen av material ska patienten ligga eller sitta.
2. En medicinsk tårta dras över armen ovanför armbågen.
3. Platsen för den framtida punkteringen behandlas med en servett som blötläggs i 70% alkohol.
4. En nål sätts in i det venösa kärlet och ansluts till ett vakuumrör. Med hjälp av ett vakuum dras 5-10 ml blod.
5. Efter injektion pressas såret med ett alkoholinnehållande material. För att förhindra blödning är armen böjd vid armbågen i några minuter, eller ett tätt fixeringsbandage appliceras av sjuksköterskan.
6. Vid analys av barn under ett år används vener på barnets huvud.
7. Ett provrör med en blodmassa skickas till laboratoriet för testning av antikroppar mot patogenen. Förvaring utförs i kylskåp i högst 48 timmar.

Forskningsteknik:

1. Serum separeras från det upptagna blodet genom centrifugering.
2. Den är uppdelad i 3 portioner, varav en är kontrollen, och de andra 2 injiceras med kardiolipinantigenet. Därefter placeras provrören i en termostat med en temperatur på + 37 ° C i 1 timme, under vilken starka bindningar skapas i det biologiska materialet mellan antikropparna och det injicerade läkemedlet.
3. Kompositionen genomgår hemolys med hjälp av kemikalier. Efter 30-60 minuter. bedöma: ett negativt resultat framgår av förstörelse och hemolys av erytrocyter. Frånvaron eller bromsningen av reaktionen i jämförelse med kontrollprovet indikerar förekomsten av en reaktion av bindning av antikroppar till antigenet. Sjukdomsstadiet bedöms utifrån fördröjningstiden.

   

Resultaten av analysen skickas till den läkare som ordinerade undersökningen eller delas ut till patienten när de självständigt går till det medicinska laboratoriet.

Sannolikhet för fel i resultat

Felet når 10-20% av fallen.

Det är kopplat till:

• Förekomsten av somatiska sjukdomar som påverkar blodets sammansättning.
• Människokroppens egenskaper.
• Förekomsten av en latent kurs av syfilis, som kombineras med en annan patologi.
• Patient försummar rekommendationerna före provtagning.
• Otillräcklig kvalifikation av laboratorieassistenter: felaktiga åtgärder när du tar blod, förvarar och transporterar det.
• Användning av reagenser som har löpt ut.
• Ojämn fördelning av antigen i ett provrör, icke-användning av kontrollblodprov vid studien av material.

Förvrängningen av resultaten kan också påverkas av sjukdomar av infektiös natur: leptospiros, återfallande feber, borrelios orsakad av fästingbett, vissa tropiska sjukdomar i Latinamerika, Afrika (pint, bejel). Deras patogener liknar i antigener treponema pallidum. I studien ger de en falsk positiv reaktion.

Avkodning

Wasserman -reaktionen är en teknik för att detektera blekt treponema i människokroppen, baserat på immunsystemets reaktion på invasionen av ett protein som liknar sammansättningen till antigenet hos syfilisens orsakande medel. Ett negativt resultat (negativt) indikerar frånvaron av bakterier i patientens blod och indikeras med ett ”-” (minus) tecken. Positivt skrivs med ett "+" (plustecken).

Positiv Wasserman -reaktion

En positiv RW indikerar att cardiolipin, ett treponema -antigen, hittades i humant blodserum.

Detta är möjligt under följande villkor:

• Patienten är sjuk med syfilis.
• Testet gav en falsk positiv reaktion.
• Med antifosfolipidsyndrom.
• Inom ett år efter behandling av syfilis.

I detta fall tilldelas alltid en ny undersökning för att detektera antikroppar mot patogenen och andra diagnostiska metoder.

Beroende på fördröjningstiden för hemolysreaktionen tolkas testresultatet enligt följande:

Antal "+"	Reaktion	Hemolys av erytrocyter i tid	Antal patogener
++++	Starkt positivt	Det fanns inga tecken	Väldigt stor
+++	Positiv	Betydande försening	Signifikant
++	Svagt positivt	Partiell	Små
+	Tvivelaktigt	Obetydlig	Mycket lite eller resultatet är fel

Patienten tas bort från registret efter tre på varandra följande studier av förekomsten av patogenen, analys av cerebrospinalvätska och undersökning av läkare: en ögonläkare, en neurolog och en otolaryngolog.

Wassermans falskt positiva reaktion

Falskt positivt RW kan utlösas av störningar i det endokrina och immunsystemet, förekomsten av allvarliga somatiska sjukdomar.

Det manifesterar sig i följande infektioner och tillstånd:

• Tuberkulos i bronkopulmonärt system.
• Bindvävssjukdomar.
• Smittsamma sjukdomar: vattkoppor, mononukleos, påssjuka, mässling.
• Under rekonvalescensperioden och efter vaccination.
• Onkologi: lymfom, myelom.
• Hepatit, levercirros, HIV -infektion.
• Diabetes.
• Reumatiska och autoimmuna sjukdomar: systemisk lupus erythematosus, spetälska.
• Efter en ny stroke, hjärtinfarkt.
• Vid förgiftning och berusning.
• Med brucellos.
• Hos kvinnor under menstruation, graviditet, inom 2 veckor före och efter förlossningen.
• Hos spädbarn under de första 10 dagarna av födseln.
• Efter att ha ätit fet mat, alkoholhaltiga drycker, rökning.

Resultatet fel påverkas också av patientens äldre ålder (80+), frekvensen av transfusion av blodkomponenter vid hemofili, leukemi och injicerade läkemedel.

Vid falskt positivt resultat upp till "++" krävs ett andra blodprov av patienten. Det utförs efter några veckor eller andra diagnostiska metoder baserade på moderna laboratorieverktyg används.

Negativ Wasserman -reaktion

Kännetecknar en frisk person (detta gäller endast sexuellt överförbara sjukdomar och gäller inte somatiska sjukdomar), som inte har smittats med syfilis.

Det bör noteras att under de första 3 veckorna efter infektion med treponema blek, visar Wasserman -reaktionen ett negativt resultat. Detta beror på den lilla mängden antikroppar i patientens blod. Efter 1,5 månader visas ett positivt test hos 25% av patienterna. Endast på höjden av sjukdomen närmar sig tillförlitligheten 80-90%.

Falskt negativt RW är möjligt under perioden med det grå-negativa fönstret i alla stadier av sjukdomen, liksom när kapillärblod tas från ett finger.

Vilka tester gör patienterna dessutom?

Kriteriet för korrekt diagnos av syfilis är isolering av sjukdomsorsaken eller förekomsten av antikroppar mot den.

Direkta forskningsmetoder inkluderar:

• TMP - mörkfältmikroskopi. Det mest pålitliga diagnostiska tillvägagångssättet. Materialet är urladdning från såret, erosion, innehållet som tas under punkteringen av lymfkörteln. I ett mörkt fält under ett mikroskop visas blekt treponema i form av en spiral. Differentiering från andra liknande patogener görs genom bakteriens morfologi och dess karakteristiska rörelser. Utifrån detta ställs en diagnos.
• Ömsesidig fond - direkt immunfluorescens. Det används för att studera urladdning från området för skador på munslemhinnan, ändtarmen, material som erhållits under obduktion, biopsi. Analystekniken består i att placera proverna på en glasskiva; under fluorescensmikroskopi observerar en laboratorieläkare ett sken av starkt grönt ljus.
• PCR - polymeraskedjereaktion. Tekniken är baserad på detektion av patogenens DNA. Källan är ryggrad, vävnad, fostervatten, sädesvätska, blod.

Sådana reaktioner och undersökningar som används:

• RIF - immunfluorescens.
• RPHA - passiv hemagglutination.
• RIBT - immobilisering av bleka treponemas.
• ELISA - enzymkopplad immunosorbentanalys.
• Immunoblotting.

På XX -talet. Wassermans reaktion var det enda sättet att diagnostisera och övervaka behandling hos syfilispatienter. Det är en billig och snabb analys med en hög noggrannhet. För närvarande har ny forskningsteknik utvecklats som ger färre opålitliga resultat. Men vissa laboratorier använder fortfarande denna teknik på grund av dess tillgänglighet.

Video om Wasserman -reaktionen

RW -blodprov: